我的质粒是6000多bp的,比较大,我想用它做基因转染,实验室有经验的都说太大了,不好转,连接在病毒上比较好转,但是那样的话,费用会贵得多,需要一万多块钱.大家有没有比较好的建议啊?用什么

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/06 11:47:09

我的质粒是6000多bp的,比较大,我想用它做基因转染,实验室有经验的都说太大了,不好转,连接在病毒上比较好转,但是那样的话,费用会贵得多,需要一万多块钱.大家有没有比较好的建议啊?用什么
我的质粒是6000多bp的,比较大,我想用它做基因转染,实验室有经验的都说太大了,不好转,连接在病毒上比较好转,但是那样的话,费用会贵得多,需要一万多块钱.大家有没有比较好的建议啊?用什么转染方法,什么转染试剂比较容易转进去?并且要转的细胞是免疫细胞,不容易提取和培养,转染试剂一般还都有细胞毒性,易杀伤细胞.哎,都急死我了.

我的质粒是6000多bp的,比较大,我想用它做基因转染,实验室有经验的都说太大了,不好转,连接在病毒上比较好转,但是那样的话,费用会贵得多,需要一万多块钱.大家有没有比较好的建议啊?用什么
6kb以上的确有点大,会影响转染效果
1.用脂质体和阳离子转染试剂.现在很多公司都有卖转染试剂的,你可以直接买转染试剂来进行转染.比如说最经典的lip2000,或者吉满生物的效果还行,主要是便宜.
2.可以尝试使用电转,但是对细胞伤害较大,需要专门的仪器.
3.慢病毒和腺病毒包装现在价钱在一万不到一些,主要还是看公司报价,你可以谈价钱.

我的质粒是6000多bp的,比较大,我想用它做基因转染,实验室有经验的都说太大了,不好转,连接在病毒上比较好转,但是那样的话,费用会贵得多,需要一万多块钱.大家有没有比较好的建议啊?用什么 琼脂糖凝胶电泳双酶切为什么没有目的基因条带我用的10000的MARKER,我的重组质粒有6000多BP,质粒5300多BP,电泳后发现只有重组质粒的条带和切下来的质粒条带,在1000BP左右并没有发现我目的基因 老师,我想做标准曲线验证一下扩增效率,知道rna的浓度,怎么换算成拷贝数,有人说起码要知道bp数,我又不是做的质粒,就是提取标本的rna,然后想倍比稀释做一下曲线,这个bp又是谁的bp呢,ABI7300的 PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 双酶切质粒后电泳 双酶切质粒pgl 6.24(5882bp)无共同buffer kPN I 2.5小时 bgl II 3.5小时 之后电泳 为什么出来1万多的带?跑的比原来质粒还有10000bp的marker还慢……怎么回事啊……求高人指点 我指的是,占地面积比较大,环境比较好.. 如何区分相差400bp的两个质粒dna 关于pgex-6p-1质粒我想知道pgex-6p-1质粒的详细图谱,常用酶切位点的具体位置(bp位置),要清楚一点的.如果有人做过这个质粒,给点实验建议最好啦~我才开始做这个双酶切,谢谢各位! 提取的质粒跑电泳出来带很杂,目的片段1700bp,用的是pMD19—T载体,从左往右第三泳道和第九泳道是空质粒 pUC19连接了大于3kb的片段,提取质粒时质粒变小了,丢了600bp,这样我就测不到目的基因序列,怎么办? 我想麻烦问下,我想看一微升质粒有多少微克DNA,用电泳跑完了,不知道应该怎么估算,我的marker是含有1*loading buffer,标准使用量6ul,其中4000bp条带约为100ng/5ul,其余条带浓度约为50ng/ul参照片段:1000 巨大芽孢杆菌的酶切质粒应该多少BP,我用的NdeI和XhoI双酶切 . T载体质粒电泳条带pMD-18T 载体和目标cDNA片段链接后应该是形成的环状质粒,对其电泳的话条带应大概位于什么位置?T载体大概是略小于3000bp,我用的目标片段是600多,加起来若是线性的话电泳应 构建的质粒,菌液PCR正确,质粒电泳却什么都没有,是怎么回事?我要将一个片段连接到载体上,片段长度:2588bp,载体:2686bp,是平末端链接,4度过夜,然后转化DH5a,蓝白筛选,用菌液PCR验证,引物用的 1%琼脂糖电泳后,为什么看不到我的目的条带?我的目的条带是177bp,从质粒中双酶切后跑电泳,几乎看不到我的目的条带,是不是因为目的条带比较小,跑的比较前面,本身就容易变得模糊,亮度减弱 我想问一下近几年破坏性比较大的台风,是哪些? 质粒酶切我最近在做连接,总是连不上,所以我想分析是哪步出问题.我想将酶切完的质粒载体与未酶切的质粒跑电泳看是否酶切成功,但不知道跑电泳能不能分辨出来(质粒大小10kb-12kb),如果可以 我想知道下面这张图谁承受的重量比较大