如何让一个细胞过度表达某种基因,来观察此基因的作用,瞬时转染和稳定转染都用什么方法转染时每个细胞只近入一个质粒还是很多质粒,过度表达的标准是什么呢

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/28 07:32:54

如何让一个细胞过度表达某种基因,来观察此基因的作用,瞬时转染和稳定转染都用什么方法转染时每个细胞只近入一个质粒还是很多质粒,过度表达的标准是什么呢
如何让一个细胞过度表达某种基因,来观察此基因的作用,瞬时转染和稳定转染都用什么方法
转染时每个细胞只近入一个质粒还是很多质粒,过度表达的标准是什么呢

如何让一个细胞过度表达某种基因,来观察此基因的作用,瞬时转染和稳定转染都用什么方法转染时每个细胞只近入一个质粒还是很多质粒,过度表达的标准是什么呢
转染的话一般是以克数来规范转染的质粒数量,所以会有很多质粒.一般转染的质粒除了带有需要过表达的基因以外,还需要带有标记基因.标记基因可以被特定的抗体检测,从而判断是否有效表达.如果你要过表达的是某种蛋白,也可以直接通过该蛋白的抗体检测,对照是没有转染的同种细胞,这样表达效果就可以通过WESTERN BLOT看见了.过表达倒没什么标准,每种蛋白表达量也不一致,选择适合自己的浓度就好.
顺转的话,我们实验室采用lipo2000,具体步骤百度文库有,英文的protocol在lipo2000的说明书上也能看到.
稳转的话一般需要在质粒上构建某个抗性基因,如嘌呤霉素抗性.这样用抗性培养基多次筛选就可以筛选出稳转的细胞株,但是比较难.

如何让一个细胞过度表达某种基因,来观察此基因的作用,瞬时转染和稳定转染都用什么方法转染时每个细胞只近入一个质粒还是很多质粒,过度表达的标准是什么呢如何选择基因表达受体细胞信号分子进入细胞如何结合基因导致表达如何将外源基因导入植物细胞并表达人体内细胞是如何进行基因选择性表达的? 有没有一个细胞里基因全部表达的给你一条蛋白质的DNA的序列,如何获得该基因并通过基因工程方法将此基因转入受体细胞,通过细胞培养方法获得表达产物,最后将此蛋白纯化? 观察植物细胞有丝分裂,解离过度观察到的现象是什么基因差异如何表达详细描述多细胞有机体的生长和发育包括细胞的各种连接方式,细胞发育成的各种组织类型,干细胞,差异基因表达,如何把它们串起来? 细胞中的基因都通过控制蛋白质的合成来进行表达?能不能通过控制RNA来表达? [紧急求助]如何理解细胞分化是基因选择性表达的结果? 如何将植物细胞中基因的蛋白表达到另一种植物中或是大肠杆菌? 如何理解细胞分化基因选择表达性.易懂就行已知某一基因mRNA序列,如何设计实验在相应细胞水平表达该基因编码的蛋白质? 在Chromatin Immunoprecipitation中,如何研究基因调控?比如给细胞加了一种药,教授说要用Chromatin Immunoprecipitation来检测表达水平升高还是降低.具体来说,应该看什么东西的表达水平?ChIP是研究DNA的,怎将目的基因导入受体细胞此步骤该如何检测? 基因在细胞外能表达吗?