RNA提取质量不好,做RT-PCR,提的RNA质量不好,260/280只达到1.6多,浓度两微升测的9.1左右,用TRIZOL提的,按步骤来的,不知道是哪个环节出了问题,或者提一点经验性的建议,还有,是不是最后必须用乙醇

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/14 10:10:19

RNA提取质量不好,做RT-PCR,提的RNA质量不好,260/280只达到1.6多,浓度两微升测的9.1左右,用TRIZOL提的,按步骤来的,不知道是哪个环节出了问题,或者提一点经验性的建议,还有,是不是最后必须用乙醇
RNA提取质量不好,
做RT-PCR,提的RNA质量不好,260/280只达到1.6多,浓度两微升测的9.1左右,用TRIZOL提的,按步骤来的,不知道是哪个环节出了问题,或者提一点经验性的建议,
还有,是不是最后必须用乙醇洗涤啊?我没做这步~
水浴重要不,听别人提的时候没有水浴的~

RNA提取质量不好,做RT-PCR,提的RNA质量不好,260/280只达到1.6多,浓度两微升测的9.1左右,用TRIZOL提的,按步骤来的,不知道是哪个环节出了问题,或者提一点经验性的建议,还有,是不是最后必须用乙醇
水浴相当重要
能使裂解液与磨碎的样品充分的接触
使细胞膜破碎释放出核酸
时间还要够并且水浴过程中要不断的振荡
而且最后一步洗涤也非常重要
乙醇主要洗去盐离子等杂质
你OD值低正是因为杂质比较多
一般按步骤来不会出问题
提取过程当中注意RNA的降解
尽量是提RNA的专用设备包括枪
提的过程始终是在超净台中
枪头溶液等都要用DEPC处理

不懂

问题可能出现的地方是很多的
磨样,泡枪头,还有操作细节
TRIZOL时候其实不需要65水浴

RNA提取质量不好,做RT-PCR,提的RNA质量不好,260/280只达到1.6多,浓度两微升测的9.1左右,用TRIZOL提的,按步骤来的,不知道是哪个环节出了问题,或者提一点经验性的建议,还有,是不是最后必须用乙醇 RT-PCR提取的是总RNA还是mRNA RNA质量中260:若 我提的RNA是用来做RT-PCR的话,260/230的值小于2.0会有影响不? rna提取的OD260/280是2.0左右,但总是跑不出条带,下面要做rt-pcr,怎么改进啊,用天泽的盒子提取的rna,测得OD260/280=2.06,浓度65ng/ul 提了好几次都是2.0左右,但一直跑不出rna条带,倒是有dna带,下面要做rt- RT-PCR的RNA如何定量 我做RT-PCR要用Marker和β-actin吗?我现在要做RT-PCR,从大鼠肝细胞中提RNA,听一个学长说提出总RNA后可以取一半跑下电泳,看看RNA的量,这一步需不需要Marker呢?还有之后做PCR跑电泳是不是还要订个β-ac 提总RNA RT-PCR 结果可用吗?左边是总RNA,右边是cDNA,现在的问题是,做actin的PCR除了浅浅的目的条带还有大量的 实时定量PCR试剂盒选那种好?还有、rna提取的试剂盒,反转录试剂盒……做鱼的 DNA RNA做PCR问题请问DNA做PCR的要求怎么样,比如DNA多长能做多长不能做,越长越好还是越短越好’反之RNA做RT-PCR也一样吗?另外DNA直接做PCR,而RNA则分反转录PCR和荧光定量PCR对吗?荧光定量是只用来 请问RT-PCR:RNA跑胶没有明显条带,能否做成目标片段RNA的PCR? 为什么pcr的重复性会这么不好呢,难道是PCR仪有问题我最近做RT-PCR,可重复性不好,已经重提了两次的RNA,内参没问题,就是特异性基因有问题?求大家帮忙分析下原因.老师说可能师弟用我的模板后 RNA跑胶多长时间才能把28S,18S和5S分开,我跑了大概30分钟,出来的是一条很亮的带,这样的RNA做RT-PCR内参能出结果,但是目的基因表达不出来,是因为RNA污染或降解吗,提取过程中我已经很注意了,以 RT-PCR:每天只能提取几份血样本的total RNA,请问我是应该提取完之后直接-80保存还是先反转录再保存?求相对定量PCR的详细流程及需要材料, RT-PCR模板选择问题.我是准备设计简并引物扩增一个鱼类的未知基因的保守区.一些文献上是提取脑部总RNA,然后反转录得到第一链CDNA,然后用这CDNA做模板扩增保守区.但是我老师的想法是直接提 蓝藻RNA提取.蓝藻RNA提取,我们一直用trizol 法提取,可是高等植物,动物提出的RNA比值都很高啊,蓝藻提的RNA比值都1.3-1.4左右,做荧光定量的话,16S跑不好.有提过的吗. 进行荧光定量pcr实验时,对提取RNA质量要求多高? 使用Access RT-PCR系统需要RNA的量是多少? PCR总RNA提取老是降解怎么回事?