如何用果蝇三点测交结果来做x2检验来验证孟德尔第三定律

如何用果蝇三点测交结果来做x2检验来验证孟德尔第三定律
如何用果蝇三点测交结果来做x2检验来验证孟德尔第三定律

如何用果蝇三点测交结果来做x2检验来验证孟德尔第三定律
regor Johann Mendel(1822~1884,Gregor是他成为神父时天主教会赐予的名字),奥地利僧侣、遗传学之父.1856~1863年,他在奥地利Brunn（今捷克的Brno）城内的奥古斯丁修道院中一块长120英尺宽20英尺的土地上进行了著名的豌豆杂交实验.结果发表在1866年的论文《植物杂交实验》中.照片上的文字即来自他论文手稿的首页.
自1694年德国植物学家Gamerarius发现植物中也存在两种性别后,人们就开始将不同品种德植物进行杂交,培育新的品种或探索遗传的规律.但大多数的探索不是因为材料选择不当,就是因为研究方法有缺陷而终告失败.例如,英国的Knight（1799）同样也选择表型不同的豌豆（Psium sativum）做杂交实验,甚至观察到了正反交结果一致的现象,但他并未认真分析这些数据的意义,因而当真理碰到他的鼻尖的时候,他还是错过了.1856年,孟德尔开始了著名德豌豆杂交实验.他吸取了前人的教训,选择了豌豆这样“能防止或能比较容易地防止外来花粉”、便于控制杂交的植物,将观察的内容限定在有限的几个“稳定的、可以区分的性状”上,将其他的性状撇开；详细记录实验结果,并用数学方法对所得的大量数据进行统计分析,藉此提出合理的假说；再进一步用实验（自交或测交）验证自己的设想.由于选材得当,方法正确,8年之后,他终于揭示了遗传的基本规律,这就是后人从他的论文中概括的分离规律与自由组合规律.
以现在的知识看,分离与自由组合定律实质上是F1在配子形成时等位基因分离,非等位基因自由组合.配子形成时等位基因的分离与组合是不易观察的但我们可以通过容易观察的相对性状的分离与组合,进行分析、推断.
在本实验中,我们将顺着孟德尔的思路,用遗传学研究中广泛应用的物种——果蝇来验证分离定律和自由组合定律.与孟德尔一样,我们将集中研究其中的1~2对性状,而将其他性状撇开.我们选用野生长翅（VgVg）与残翅（vgvg）果蝇为亲本,研究一对相对性状的遗传规律；用长翅、檀黑身（VgVgee）与残翅、灰身（vgvgEE）果蝇杂交,研究两对相对性状的遗传规律.当然,只要条件允许,也可用其他性状进行探讨.在时间安排上,本实验可以与“果蝇的伴性遗传”、“果蝇X染色体上基因顺序的测定”同步进行.因为这几个实验的进程相同.如果室温合适,可让学生将果蝇拿回宿舍培养.这样便于观察与记录.
完成这几个实验需要五周的时间,这或许是你至今做过的时间最长的生物学实验.从技术上讲,这几个实验并没有包含任何“高科技”,但是你要是把这些实验看成是你第一次进行遗传学的研究,所得的感受要比机械地完成一个实验任务要有意义得多.
实验材料、器具和药品
每一个学生
体视显微镜（或普通光学显微镜）、培养瓶、麻醉瓶、白色塑料板或硬纸板、培养皿、滤纸条、小毛笔、不干胶标签.
每一组学生
野生型长翅果蝇、残翅果蝇原种；
灰身、残翅果蝇,檀黑身、长翅果蝇原种；
乙醚（装在滴瓶中）.
实验步骤
一对和两对性状杂交实验的步骤基本相同.这两个杂交实验持续的时间较长,任何一个环节出错都将影响最终结果,所以每步操作都应非常谨慎.在着手进行实验之前,最好能制定一个较详细的实验方案,拟订杂交组合,列出将要观察的内容.明确预期的目标是什么才能知道你是否已达到目的,才能明确你观察到的某一现象是正常结果还是异常情况.要随时记录观察的结果,详细、准确的记录是深入分析的前提.这样就使一个实验成为有目的、有意识的行动,即便于准备有关材料,也便于在实验完成后分析结果,或继续实验时有个参考依据.后文附有记录表,供你参考.
3、部分同学可以计划一个测交实验,测交实验须用隐性亲本的处女蝇.收集隐性亲本的处女蝇,以备下周使用,并请你设计自己的实验流程及相应的记录表.
第三周
1、观察记录F1表型接种杂交亲本后约11~12天,F1即开始出现,对一对性状杂交实验,观察F1的翅形；对两对性状杂交实验,观察体色和翅形,分别予以记录.每个杂交组合至少统计30只.
2、F1兄妹交麻醉F1子蝇,仔细挑选5~10对,放入一新的培养瓶,置于25℃下培养.雌蝇是否需用处女蝇?每个杂交实验都要做正反交.
3、拟作测交实验的同学,将隐性亲本的处女蝇与F1杂交.
第四周
清除培养瓶中所有F1果蝇.
第五周
1、观察统计F2 接种F1亲蝇11~12天后F2子蝇出现.至第五周F1亲蝇已接种14天,此时F2子蝇大量出现.将所有F2麻醉至死,仔细观察、统计不同表型子蝇的数目,每个实验小组统计100~200只,统计之后将果蝇移入死蝇盛留器中.
2、为使实验结果的统计分析更为准确,要求观察的群体尽可能大.为达到这个目的,我们可将整个班同一实验的观察结果累加起来进行分析.在对两对性状的杂交实验结果进行X2测验以前,可以先画出条形图,对比观察值与期望值之间的差异.