我用梯度PCR从50度到60度都有条带 但都不够亮 请大家帮忙分析原因 怀疑是引物不合适 谢谢

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/11 18:32:40

我用梯度PCR从50度到60度都有条带 但都不够亮 请大家帮忙分析原因 怀疑是引物不合适 谢谢
我用梯度PCR从50度到60度都有条带 但都不够亮 请大家帮忙分析原因 怀疑是引物不合适 谢谢

我用梯度PCR从50度到60度都有条带 但都不够亮 请大家帮忙分析原因 怀疑是引物不合适 谢谢
最直接的就是切胶测序.
第二个就是设计nested PCR的引物提高扩增特异性;另外要看你有没有positive control,亮的话说明你要扩增的那段有问题;不亮的话说明你PCR有问题;negative control也能说明些问题比方说你那个不亮的条带有可能是primer dimer...

我用梯度PCR从50度到60度都有条带 但都不够亮 请大家帮忙分析原因 怀疑是引物不合适 谢谢 谁能给我介绍一下这个PCR仪,可不可以用梯度PCR ,梯度PCR 的各个参数什么设置? 做梯度PCR时,设置梯度值一般怎么结合上下游引物设?怎么让跑出的条带更特异?我一般能详细点回答更好了.我一般都是以上下游引物中最低的那个开始设,2度一个梯度,这次设计的引物特异性不 琼脂糖电泳没有条带的原因?我跑琼脂糖电泳,用的是梯度PCR扩增产物,但是跑出来之后没有条带,连marker也看不见,是什么原因?我的TBE没有灭菌,也没有调PH值,还有琼脂糖用了快3年了, 请问小鼠的DMC1基因是普通的基因吗?不是特殊基因吧.用该基因设计引物,以CDNA为模板,PCR后只有引物二聚没有目的条带,退火温度做了梯度,还是没有条带.是什么原因呢,我的同事用相同的模板, 梯度PCR仪是干什么用的 PCR模板的问题老师看到PCR产物电泳出的条带比较暗,让我把模板稀释到20倍,以前稀释到50倍,为什么变小了? 提取细菌DNA检测到有条带,PCR后无条带;而基因组DNA检测到无条带的,PCR后却有条带.怎么解释? ABI7900 能做梯度PCR 我想用ABI7900做梯度PCR,请问怎么操作, 请帮我分析PCR结果?两个基因,用同一个marker,梯度PCR,结果如图,怎样调整,左边PCR才能出结果. 菌液PCR不同条带将已扩增出来的993bp的cDNA与T载体连接,之后DH5α转化,涂平板,挑克隆!菌液PCR为何一组检测到750bp有条带,一组1000bp处有条带两种结果!1000bp条带处是我预期的条带!麻烦大师留下相 用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致.用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致,这个很费事,我一般是配50ul的内参基因pcr反应体系,分几 嵌套式PCR怎么稀释第二部的产物?我试过2倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、100倍,都没有条带.第一次pcr有条带,不过较淡.是用无菌水稀释没错吧?然后做为第二部的模板再次PCR?是用无菌水稀释 嵌套式 PCR第二步反应无产物?嵌套式PCR怎么稀释第二部的产物?我试过2倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、100倍,都没有条带.第一次pcr有条带,不过较淡.是用无菌水稀释没错吧?然后做为第二部的 请问我的电泳图跑成这样,是为什么?我的模板用的是第一次PCR的产物,体系总共是60微升,模板2微我的第一次PCR用的是质粒DNA 而且产物条带还行 推荐梯度PCR仪? 什么是梯度PCR? 什么是梯度PCR?