上游引物和下游引物的温度差4度可以么?

上游引物和下游引物的温度差4度可以么? 什么是上游引物和下游引物? 求助巢式PCR退火温度的设定我最近准备做巢式PCR,下游引物用oligo dT,上游用两个基因特异性引物,但上游的两个引物和下游的oligo dT相比,Tm值差了将近10度,这样退火温度怎么设定呢? 上游引物和下游引物有什么区别 上游引物和下游引物为什么分别加 用pp5设计引物,扩增内含子,是不是将上游引物和下游引物设计在外显子上就可以了? 什么是上游引物和下游引物?麻烦再问一下：上下游引物是不是多用在多对引物的扩增中？？？谢谢 PCR扩增基因设计引物时,用Primer5检测上游引物和下游引物的互补性,显示free energy= 1.50 Kcal/mol这样的引物可用吗? 上游引物用英文怎么说引物-R引物-F哪个是上游的哪个是下游的啊? 退火温度低会对PCR产生什么影响?我做菌落PCR,使用一个特异性上游引物和一个T7下游通用引物,退火温度用的是较低的48度,但引物的Tm分别为57,71,阳性对照都没有出结果,请问是怎么回事呢?退火 pcr 为什么要同时用上下游引物可以只用上游,或者下游引物吗?是不是同时用上下游,这样才能P出想要的大小片段.如果只用上游或者下游,会P的过大或者过小 反转录PCR的引物也分为上游引物和下游引物吗.是不是和普通的PCR引物不一样啊.我有个很纠结的问题.刚才看了一个PCR 原理的视频顿时纠结了,视频上是双链DNA,上游引物和下游引物分别结合在 pp5引物设计用PRIMER自动搜索设计的多对引物中,能不能用一对引物的上游与另一对引物的下游配对 测序上游引物损坏怎么办?PCR产物直接测序,寄到时候发现装有上游引物的小管裂开,引物不能用了,只能重新邮寄上游引物吗?只有下游引物不能测吗? 已知下游引物序列,怎么去基因DNA上找到这个序列?如给定3-GTGTATGTGGCAATGCGTTC找的方法是不是和上游引物不一样? ssr引物筛选我是做分子标记的,现在遇到一些问题?1、根据引物报告单上的退火温度,上游和下游温度不一样怎么选择?2、我有600对引物,3个亲本,现在要筛一遍,用96孔的PCR板P的时候,每一对退火 primer3引物设计结果怎么只有下游引物是原基因的互补序列,上游引物是原序列?直接在线设计的LEFT PRIMER tacacaaagacgctgccaagRIGHT PRIMER tggcttgttgttacccatga上游引物处原序列 tacacaaagacgctgccaag下游tcatgggtaac 请问PCR一定要两条引物吗?如果我只加一条上游引物,是否可以扩出更长的片断?因为没有下游引物的中止作用了.