乳鼠肝脏细胞原代培养如何进行?求具体的方法步骤

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/04/30 14:23:50

乳鼠肝脏细胞原代培养如何进行?求具体的方法步骤
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乳鼠肝脏细胞原代培养如何进行?求具体的方法步骤
博凌科为生物科技-为你一周龄大鼠,断颈处死,活力碘消毒,无菌取出肝脏,于无菌维持液中漂洗,用眼科剪仔细清除肝包膜,韧带,沿肝边缘剪切肝尖组织(绕开肝蒂等)转入青霉素小瓶中,用眼科剪绞碎,剪成0.1-1.0mm3大小的碎片,加入5倍体积无菌维持液,用滴管轻轻吹打,吸出上层血细胞再用无菌维持液反复清洗3~5次,加入10倍体积无菌胰蛋白酶消化液,37℃消化,消化过程中不断震荡,至组织块边缘变薄(镜下观),离心 (1000rpm,10分钟)弃去上面酶液,用无菌维持液将组织块清洗2~3次,加入新鲜无菌胰蛋白酶消化液重复上述步骤.此时组织块边缘模糊,1000rpm离心10分钟,取沉淀即为消化下的细胞,重新用无菌维持液悬浮,离心,洗1~2次,用20%生长液悬浮即得细胞悬液；将消化过的组织块重复消化5~6次至组织块消化完全,重复以上操作,合并几次所得细胞悬液,计数,调整细胞浓度为210 5 个细胞/mL,将细胞悬液接种于塑料培养瓶中,置于37℃,5%CO2,饱和湿度培养箱中培养.培养48小时后,换新鲜配置的培养液培养5小时,可除去绝大部分血细胞及杂细胞,37℃,5%CO2,饱和湿度培养箱中培养,每隔3天换培养液,获得单层肝细胞.

乳鼠肝脏细胞原代培养如何进行?求具体的方法步骤如何进行细胞原代培养? 下面关于原代培养的说法,不正确的是A原代培养的细胞分化程度低B原代培养的细胞在培养过程中进行贴壁生长C原代培养的细胞传到10代部分细胞已衰老死亡D原代培养的细胞传到50代细胞的遗如何改进动物细胞原代培养技术,来减少微生物的污染?主要是如何减少微生物的污染另外，进行动物细胞原代培养的动物组织，除了胚胎小鼠外，还可以用什么材料？细胞原代培养的意义简述细胞原代培养的过程. 骨髓瘤细胞与进行原代培养的细胞相比,该物质发生的主要变化是什么? 原代培养的细胞每代(包括原代)都需要冻存吗? 动物细胞培养为什么要进行原代培养直接将细胞悬液分瓶培养不好吗在进行心肌细胞原代培养时1%的培养液是否可以,效果如何?在进行心肌细胞原代培养时,需要用含血清的培养基中止胰酶的消化作用,我现在使用的是含血清10%的培养液,但近日看北医一个细胞培我想做细胞原代培养,求推荐好的生物技术中心? 我想做细胞原代培养,求推荐好的生物技术公司? 细胞原代培养的实验的思考题怎样提高细胞原代培养的效率? 威斯腾生物培养的原代细胞好不好? 请问哪里可以做心肌细胞的原代培养? 请问哪里可以做心肌细胞的原代培养? 肝癌细胞原代培养的问题从病人取下的肝癌组织进行原代细胞培养,其首次传代困难吗?