为什么提取RNA的浓度总是太低

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 06:51:10

为什么提取RNA的浓度总是太低
为什么提取RNA的浓度总是太低

为什么提取RNA的浓度总是太低
rna.提取
称取鲜酵母 159或干酵母粉 2.5g,倒入 100ml三角瓶中,加 NaCl 2.5g,水25ml,搅拌均匀,置于沸水浴中提取lh.
2.分离
将上述提取液用自来水冷却后,装入大离心管内,以4000r/min离心10min,使提取液与菌体残渣等分离.
3.沉淀RNA
将离心得到的上清液倾于50ml烧杯内,并置入放有冰块的250ml烧杯中冷却.待冷至10℃以下时,用6mol/L HCI 小心地调节pH值至2.0~2.5(注意严格控制pH).调好后继续于冰水中静置10min,使沉淀充分,颗粒变大.
4.洗涤和抽滤
上述悬浮液以 4000r/min离心 10min,得到 RNA沉淀.将沉淀物放在 10ml小烧杯内,用95%的乙醇 5~10ml充分搅拌洗涤,然后在布氏漏斗上用射水泵抽气过滤,再用 95%乙醇5~10ml淋洗 3次.
5.干燥
从布氏漏斗上取下沉淀物,放在6cm表面皿上,铺成薄层,置于80℃烘箱内干燥.将干燥后的RNA制品称重,存放于干燥器内.
应该是这里的某个步骤错了吧!

这是个技术问题

为什么提取RNA的浓度总是太低 提取的总RNA跑完电泳条带总是很浅,是提的量少浓度低了还是怎么回事?1%琼脂糖凝胶电泳 用CTAB提取DNA,总是提到RNA,为什么? trizol提取烟草组织100mg叶片总RNA,最终浓度大概多少?30ul溶解RNA.每次提的OD260/OD280较低, 从小鼠肝细胞中提取病毒RNA,但是结果总是有很多肝细胞RNA.怎么能提高病毒RNA的比例呢?我下一步是PCR,因为病毒RNA估计比例很低所以P不出结果~ 提取的RNA是哪种RNA 质粒提取A260/A280比值太低对动物细胞转染的影响 比值太高呢?我提两次质粒,一次A260/A280比值2.2,一次1.6.如果转染动物细胞有什么影响?用仪器测得的质粒浓度只是质粒的浓度吗,并不包括RNA或者 RNA提取后OD值及浓度都好为什么电泳未见条带啊 rna提取的OD260/280是2.0左右,但总是跑不出条带,下面要做rt-pcr,怎么改进啊,用天泽的盒子提取的rna,测得OD260/280=2.06,浓度65ng/ul 提了好几次都是2.0左右,但一直跑不出rna条带,倒是有dna带,下面要做rt- 为什么酵母的RNA提取滤渣用乙醇洗涤? 为什么提取的RNA 电泳后又拖尾现象? 提取小鼠肝脏总RNA时,我的260:3.4448;280:1.7921.比值1.92.浓度是2755.84.260和280为什么那么高呢?是不是因为浓度太高的问题?我有些数据280甚至能达到2以上,260大于4,看文献说260在0.1-0.5之间最好,我 提取DNA时,一定要加RNA酶吗?为什么我每次提取都会把RNA也提取出来,RNA不是很容易降解吗?而且DNA为甚总DNA为甚总是降解呢? 提取得总RNA有蛋白质污染会影响反转录的CDNA的浓度吗 RNA的提取方法是什么? 提取的RNA用Dnase消化之后浓度会降低吗 为什么空气中的甲烷浓度太低无法燃烧 RNA提取为什么要加液氮研磨