用takara的试剂盒提取大米和大豆的基因组,pcr之后跑电泳,但是电泳总是没结果,没条带.试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就换了一个新的,结果还是提不出来,

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/04 19:32:51

用takara的试剂盒提取大米和大豆的基因组,pcr之后跑电泳,但是电泳总是没结果,没条带.试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就换了一个新的,结果还是提不出来,
用takara的试剂盒提取大米和大豆的基因组,pcr之后跑电泳,但是电泳总是没结果,没条带.
试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就换了一个新的,结果还是提不出来,操作应该也没有问题,电泳的话,marker跑的很好,pcr的话,用相同的引物相同的机器做其他实验也是有结果的,所以应该也没有问题.请问还有哪些可能的原因啊.

用takara的试剂盒提取大米和大豆的基因组,pcr之后跑电泳,但是电泳总是没结果,没条带.试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就换了一个新的,结果还是提不出来,
PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来的东西跑个胶看一看.如果抽出来了,但是PCR没跑出来,就把模板浓度降低一下;如果DNA没跑出来,就要从抽提步骤上找问题.
你们用的试剂盒是洗脱柱类型的吗?如果是,就我们自己的操作,仅仅靠试剂盒里提供的试剂,抽提效果不好,一般我们先用自己配制的抽提缓冲液(参考分子克隆)把组织磨碎、离心弃上清后后再用试剂盒里面相关的试剂操作,需要注意的是样品要研磨充分、量不要贪多.
如果是离心沉淀的方法,分子克隆书上提供的就可以搞定.

模板加的太多确实会影响pcr,因为模板量太大的话,在退火的时候,模板和模板之间会优先配对,从而阻止了引物与模板的结合,继而影响扩增

电泳电极没插反吧 ?

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