作业帮急求细菌基因组RNA提取试剂盒?知道的亲告诉帮忙
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/13 07:07:29
急求细菌基因组RNA提取试剂盒?知道的亲告诉帮忙
急求细菌基因组RNA提取试剂盒?知道的亲告诉帮忙
急求细菌基因组RNA提取试剂盒?知道的亲告诉帮忙
我们实验室用的是博凌科为的试剂盒,下面是一些我了解的东西供你参考
注意事项
1、第一次使用前 请先在漂洗液RW瓶加入指 定量乙醇,加入后请及 时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2、所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机.
3、需要自备乙醇,β-巯基乙醇.
4、裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服.若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗 .
5、预防RNase 污染,应注意以下几方面：
1）经常更换新手套.因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染.
2）使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染.
3）RNA 在裂解液RLT 中时不会被RNase 降解.但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿.玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时,塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase.
4）配制溶液应使用无 RNase 的水.（将水加入到干净的玻璃瓶中,加入 DEPC 至终
浓度 0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌.）
6、关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总 RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免 DNA 的微量残留,本公
司的 EASYspin 系列 RNA 提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了
特殊吸附能力的吸附膜,在大多数 RT-PCR 扩增过程中极其微量的 DNA 残留（一
般电泳 EB 染 色紫外灯下 观察不可 见）影响不 是很大,如果要进行 严格的 mRNA
表达量分析如荧光定量 PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
Fermentas的试剂盒，很好用。