怎样用磷酸氢二钾和柠檬酸配置0.05mol/L PH为6.8的磷酸缓冲溶液?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 02:21:30

怎样用磷酸氢二钾和柠檬酸配置0.05mol/L PH为6.8的磷酸缓冲溶液?
怎样用磷酸氢二钾和柠檬酸配置0.05mol/L PH为6.8的磷酸缓冲溶液?

怎样用磷酸氢二钾和柠檬酸配置0.05mol/L PH为6.8的磷酸缓冲溶液?
缓冲溶液(英文:buffer solution)是一种能在加入少量酸或碱和水时大大减低pH变动的溶液.pH缓冲系统对维持生物的正常pH值和正常生理环境起到重要作用.多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动,而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化.在生物体中有三种主要的pH缓冲体系,它们是蛋白质缓冲系统、重碳酸盐缓冲系统以及磷酸盐缓冲系统.每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的.
在生化研究工作中,常常需要使用缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度.研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到研究工作的成效.如果“提取酶”实验体系的pH值变动或大幅度变动,酶活性就会下降甚至完全丧失.所以配制缓冲溶液是一个不可或缺的关键步骤.
常用作缓冲溶液的酸类
由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用.生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子.如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应.
硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖.
柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用.
磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来.而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小.
三羟甲基氨基甲烷:它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑制作用.其主要缺点时温度效应.这点往往被忽视,在室温pH是7.8的Tris缓冲液,4℃时是8.4,37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时,其氢离子浓度就增加了10倍.在pH7.5以下,其缓冲能力极为不理想.
决定缓冲液pH值的因素
设缓冲系统的弱酸的电离常数为K(平衡常数),平衡时弱酸的浓度为[酸],弱酸盐的浓度为[盐],则由弱酸的电离平衡式可得下式:
[H+] = Ka {[弱酸]/[共轭碱]}
pH = pKa + log {[共轭碱]/[弱酸]}
这就是Henderson-Hasselbach 等式.
如果[弱酸] = [共轭碱],
pH = pKa
根据此式可得出下列几点结论:
1 缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数K及盐和酸的浓度有关.弱酸的pH值衡定,但酸和盐的比例不同时,就会得到不同的pH值.酸和盐浓度相等时,溶液的pH值与PK值相同.
2 酸和盐浓度等比例增减时,溶液的pH值不便.
3 酸和盐浓度相等时,缓冲液的缓冲效率为最高,比例相差越大,缓冲效率越低,缓冲液的一般有效缓冲范围为PK±1pH.
缓冲溶液的配制
只要知道缓冲对的PK值,和要配制的缓冲液的pH值(及要求的缓冲液总浓度),就能按公式计算[盐]和[酸]的量.这个算法涉及对数换算,较麻烦,前人为减少后人的计算麻烦,已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系列出了表格.只要我们知道要配制的缓冲液的pH,经查表便可计算处所用缓冲剂的比例和用量.例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液.
经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升,而0.2M Na2HPO492.0毫升.依此可推论出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升,而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升.
计算好后,按计算结果准确称好固态化学成分,放于烧杯中,加少量蒸馏水溶解,转移入50ml容量瓶,加蒸馏水至刻度,摇匀,就能得到所需的缓冲液.
各种缓冲溶液的配制,均按表格按比例混合,某些试剂,必须标定配成准确浓度才能进行,如醋酸、氢氧化钠等.另外,所有缓冲溶剂的配制计量都能从以上的算式准确获得.

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