蛋白纯化问题蛋白纯化过程中,用NTA柱纯化的效果不好,杂带还是很多,是柱子填料不好还是什么问题啊?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/30 17:39:21

蛋白纯化问题蛋白纯化过程中,用NTA柱纯化的效果不好,杂带还是很多,是柱子填料不好还是什么问题啊?
蛋白纯化问题
蛋白纯化过程中,用NTA柱纯化的效果不好,杂带还是很多,是柱子填料不好还是什么问题啊?

蛋白纯化问题蛋白纯化过程中,用NTA柱纯化的效果不好,杂带还是很多,是柱子填料不好还是什么问题啊?
可能是表达的问题.在表达你目的蛋白的同时有很多杂蛋白被同时表达了.
你可以增加前面洗脱的步骤,尽可能多的将杂蛋白洗脱掉.

应该是没洗干净。上样后用上样缓冲液洗,然后用低浓度咪唑洗,最后再洗脱样品。至于具体浓度,要做预实验确定。