我提取的未知的粗酶液,做SDS-PAGE电泳,为什么蛋白样品要煮沸处理?煮沸离心后我的蛋白是不是会被离掉?这是为何啊?如果这样蛋白质是不是变性啦?那那些markers也需要煮沸才能上样么?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/30 11:02:15

我提取的未知的粗酶液,做SDS-PAGE电泳,为什么蛋白样品要煮沸处理?煮沸离心后我的蛋白是不是会被离掉?这是为何啊?如果这样蛋白质是不是变性啦?那那些markers也需要煮沸才能上样么?
我提取的未知的粗酶液,做SDS-PAGE电泳,为什么蛋白样品要煮沸处理?煮沸离心后我的蛋白是不是会被离掉?
这是为何啊?如果这样蛋白质是不是变性啦?
那那些markers也需要煮沸才能上样么?

我提取的未知的粗酶液,做SDS-PAGE电泳,为什么蛋白样品要煮沸处理?煮沸离心后我的蛋白是不是会被离掉?这是为何啊?如果这样蛋白质是不是变性啦?那那些markers也需要煮沸才能上样么?
SDS-PAGE电泳你做的是变性电泳,也就是加SDS,并需要沸煮的.
在沸煮过程中,蛋白样品必然变性由原来的球状变成线性,但是形成的时候蛋白质-SDS复合物,所以不会沉淀.这种复合物在凝胶中迁移率只跟蛋白质分子量大小有关,所以能进行蛋白的分离鉴定.
Marker一般都是预变性的也就是预煮过的,所以可以不用再煮了.

为了使蛋白变性,使得电泳时只以蛋白分子大小来分离不同的蛋白。
MAKER也是要煮沸的。

就是让蛋白变性啊,让蛋白的二级结构打开变成一级的线性结构,marker不需要煮沸,在你买maker之前这些marker就已经被处理好了,你只需要在上样的时候将marker加入就行了