作业帮DNS法测定葡萄糖标准曲线为什么要加浓硫酸和苯酚,还要不要加DNS试剂.测定样品还原糖时加硫酸苯酚?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/05 16:59:05
DNS法测定葡萄糖标准曲线为什么要加浓硫酸和苯酚,还要不要加DNS试剂.测定样品还原糖时加硫酸苯酚?
DNS法测定葡萄糖标准曲线为什么要加浓硫酸和苯酚,还要不要加DNS试剂.测定样品还原糖时加硫酸苯酚?
DNS法测定葡萄糖标准曲线为什么要加浓硫酸和苯酚,还要不要加DNS试剂.测定样品还原糖时加硫酸苯酚?
没有加浓硫酸啊.
10mg/mL标准葡萄糖溶液：
精密称取无水葡萄糖1.0000置80mL蒸馏水中搅拌溶解,待完全溶解后定容至100mL.标记为10mg/mL的标准葡萄糖溶液,同时标记配制日期,4℃条件下保存.
DNS试剂的配制
称取3,5-二硝基水杨酸31.50g缓慢加入5000mL蒸馏水中,不断搅拌,水浴至45℃,逐步加入1000mL氢氧化钠溶液（e）,不断搅拌至溶液清澈透明（在加入氢氧化钠溶液过程中,溶液温度不要超过48℃）.再逐步加入四水酒石酸钾钠910.0g、苯酚25.0 g、无水亚硫酸钠25.0 g,继续45℃水浴加热,同时补水3000mL,不断搅拌,至上述物质完全溶解后,冷却至室温,并定容到10000 mL.用滤布过滤,将滤液储存于棕色瓶中,标识名称和配制日期,避光,室温保存7天后可以使用.有效期6个月.
分析步骤：
标准曲线的绘制：
取8支试管按下表加入相关试液后再加入1.5mLDNS试剂,充分摇匀,置沸水浴中反应5min.迅速冷却至室温,用水定容至5.0mL,用0号试管试液作对照,在540nm波长下测其它各试管试液的吸光度.以吸光度为纵坐标,以葡萄糖含量为横坐标绘制标准曲线.
试管号
0
1
2
3
4
5
6
7
缓冲液加入量（μL ）
1000
990
985
980
975
970
965
960
葡萄糖标准液加入量（μL ）
0
10
15
20
25
30
35
40
葡萄糖含量（μg）
0
100
150
200
250
300
350
400