PCR电泳出现非特异条带原因概括地讲……

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/01 03:20:11

PCR电泳出现非特异条带原因概括地讲……
PCR电泳出现非特异条带原因
概括地讲……

PCR电泳出现非特异条带原因概括地讲……
出现非特异性扩增带
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带.非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数 过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶 则不出现,酶量过多有时也会出现非特异性扩增.其对策有:①必要时重新设计引 物.②减低酶量或调换另一来源的酶.③降低引物量,适当增加模板量,减少循环次 数.④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性,65℃左右退火与延伸).

引物设计不好

退火的温度高了吧!

PCR电泳出现非特异条带原因概括地讲…… 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后出现很多弥散的条带是PCR的原因还是电泳的原因呢? 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? pcr电泳出现模糊团状条带是什么原因造成的 基因的PCR扩增出现非特异扩增产物,何故? PCR出现大分量弥散条带?电泳RNA时无DNA条带.可能是什么原因? PCR引物blast结果,如图 12处是我的目的基因 可是还出来结果三,是不是PCR的结果就会出现非特异条带?我是不是应该考虑换引物啊? 请问若因为非特异扩增导致PCR产物弥散,理论上弥散带里是否应该包含目的条带?谢谢TT-TTPCR产物电泳弥散,因为退火温度为55,所以初步考虑是退火过低导致的非特异扩增.但小女子有一疑问,我的 目的片段连接表达载体后酶切出非特异带为什么我的载体11KB,连接了目的片段.PCR能扩出目的带,双酶切出现了三条带,一条载体,一条目的条带,一条非特异带3KB左右.载体上这两个酶只有一个酶 PCR后电泳是特异性条带,但测序总是出现结合问题.怎么办? pcr产物与Loading buffer没有混匀,后果是什么?会不会导致电泳时拖尾?我pcr产物跑胶后除目的条带以外出现拖尾,原因可能是与loading buffer 没有混匀吗? PCR电泳marker条带清晰,但是样本的条带有的缺失,有的是有条带,但不是我所想要的,请问有什么原因? 二次PCR的产物电泳图观察,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾, 我做出来的PCR产物跑胶能出现清晰地条带,为什么测序公司不能测序,说是信号中断,什么原因? PCR电泳条带是什么,如何形成的?形成原理是什么? PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么? ISSR标记,PCR产物电泳条带不清晰,怎么办