单克隆菌落就一定是单基因型吗?有个问题困扰我好久了,最近构建了一个工程菌,是将野生型菌株的一个启动子片段,连入T载体,再用同源重组的方法整合进野生型菌株基因组上的另一个位置,然

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/11 15:44:30

单克隆菌落就一定是单基因型吗?有个问题困扰我好久了,最近构建了一个工程菌,是将野生型菌株的一个启动子片段,连入T载体,再用同源重组的方法整合进野生型菌株基因组上的另一个位置,然
单克隆菌落就一定是单基因型吗?
有个问题困扰我好久了,最近构建了一个工程菌,是将野生型菌株的一个启动子片段,连入T载体,再用同源重组的方法整合进野生型菌株基因组上的另一个位置,然后挑选阳性克隆测序验证.
但是纠结的是我对阳性克隆的插入片段进行PCR测序后,发现有套峰,于是T-A克隆后再测序,发现10个克隆子中多数有3个位点突变,与克隆前测序套峰的位置一致(见图片中红色框标注),少数没有突变.因此认为是菌不纯,没跳到单克隆,然后将菌株稀释划线,又挑了很多单克隆测序,均发现有套峰,也就是一直没有得到基因型单一(或者都突变,或者都不突变)的菌株,这是为什么呢?
难道单克隆菌落在复制时不同细胞之间的基因组拷贝间也会有碱基差异吗?单克隆就一定是单基因型吗?

单克隆菌落就一定是单基因型吗?有个问题困扰我好久了,最近构建了一个工程菌,是将野生型菌株的一个启动子片段,连入T载体,再用同源重组的方法整合进野生型菌株基因组上的另一个位置,然
理论上单克隆菌落应该是基因型,或者这个菌株有些特别,易突变.
还有可能是这个菌株一菌株之间有粘连,你划线可能没有得到单克隆.
你可以试一下,取一点菌液,用培养基稀释,吹打,再涂板试一下.尽可能的让菌长得少一些.

单克隆菌落就一定是单基因型吗?有个问题困扰我好久了,最近构建了一个工程菌,是将野生型菌株的一个启动子片段,连入T载体,再用同源重组的方法整合进野生型菌株基因组上的另一个位置,然 可见的E.coli单克隆菌落会有多少个个体呢? 什么是单克隆菌落? 关于真菌的菌落有个问题生物课上说:真菌菌落是有许多同种的真菌组成的,那么木耳也是真菌,他有菌落吗? 关于454焦磷酸测序的原理问题测序过程到底是如何进行的?我知道每有一个碱基匹配正确就会发出荧光,但我的问题如下:每个磁珠上的单克隆是同个目的基因的不同片段还是不同的目的基因, 请问菌株和单菌落的概念,以及它们之间的联系和区别单菌落是有一个祖先分裂而来遗传上一致,那菌株的概念又是什么呢?与单菌落有何区别呢? 请教一个微生物实验中,制备菌悬液的问题.是这样的,我从肉中分离出了它的腐败菌,已经反复的平板划线分离,得到了纯化的单菌落.我现在要将得到的单菌落制成一定浓度(10四次方~10五次方 菌落PCR有带,可提取的质粒没带!请问我转化的单菌落做菌落PCR有带,单相对应的菌落提取质粒P不出带是什么原因呀?引物是特异性的! 求大肠杆菌不同菌落形态的问题我用甘油保存大肠杆菌,刚开始生长的菌落是圆形边缘平整,但过大概3个月,接种生长的菌落变形了,边缘不平整,菌落形状不规则为什么出现这种情况,菌种有没有 尿蛋白3个加号,肾就一定有问题吗 单克隆检测抗体和单克隆捕获抗体有什么区别? 一个种群中,亲代基因型频率是:AA30% 、Aa60%、 aa10%.那么子代基因型频率分别为:AA36% 、Aa48%、 aa16%.这里亲代和子代都是一个种群的,同一种群基因型频率不是应该相同吗?这里为什么不一样?困 我的单克隆菌落PCR除了很明确的目的条带外.在2000多上面还有微弱的两条带.不知道是什么条带.难道是菌的DNA?这样的情况下我能送去测序吗?有经验的朋友帮忙解释下呗.没分.很穷. 请问:划线分离后怎样识别菌落?单菌株染色后很容易识别,请问划线分离后由于识别的是菌落又没染色,这与单株菌是否存在一定的差异?应根据哪些特点去识别? 伊红美蓝培养基上紫黑色的菌落一定是大肠杆菌吗? 关于平板计数法的计算问题?已知我有一个样品要做菌落,目前我要做两个稀释度,一个是10倍,一个是100倍.每个稀释度做两个培养皿,得到结果:是10倍稀释度分别有7个和8个菌落,而100倍的有3和2 有叶绿体就一定能进行光合作用吗注意问题 单倍体克隆与单克隆有什么区别