求做染色质免疫共沉淀的原理和大致步骤

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/01 13:10:28

求做染色质免疫共沉淀的原理和大致步骤
求做染色质免疫共沉淀的原理和大致步骤

求做染色质免疫共沉淀的原理和大致步骤

利用识别特定蛋白的抗体,捕获与此蛋白相互作用的核酸.特定蛋白多半是能够与核酸结合的,转录因子,调控原件等等,而抗体可以是识别不同修饰的蛋白,例如乙酰化什么的,用于转录调控,表观遗传学研究等等

  1. 抗体挂到固相支持物上（磁珠或琼脂糖）,制备亲和纯化柱

  2. 对细胞进行甲醛交联,固定蛋白与核酸的结合物

  3. 将蛋白核酸复合物抽提出来,再将染色质片段通过超声或酶解,打断成小片段

  4. 将此小片段加到制好的亲和纯化柱上孵育

  5. 将未结合物质洗去

  6. 将目标蛋白核酸复合物洗脱收集

  7. 蛋白酶K加热解交联

  8. 纯化核酸

  9. 根据需要进行qPCR或者是测序,芯片等


这个可以在百度上查到，这里写出来就太多了。做转录因子结合位点时用到的

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