计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数指的是哪个的稀释倍数?是指挑菌接种1:100的那个比例吗?转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积 我用的是CaCl2法制备的

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/27 16:14:43

计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数指的是哪个的稀释倍数?是指挑菌接种1:100的那个比例吗?转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积 我用的是CaCl2法制备的
计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数指的是哪个的稀释倍数?
是指挑菌接种1:100的那个比例吗?
转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积
我用的是CaCl2法制备的

计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数指的是哪个的稀释倍数?是指挑菌接种1:100的那个比例吗?转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积 我用的是CaCl2法制备的
转化后在含抗生素的平板上长出的菌落即为转化子,根据此皿中的菌落数可计算出转化子总数和转化频率,公式如下:
转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积
转化频率(转化子数/每ug 质粒DNA)=转化子总数/质粒DNA 加入量(ug)
下面以大肠杆菌TG1电转感受态为例给你演示一下:
第一天,上午取大肠杆菌TG1菌液划线平板(一般要48小时以上才能长出单克隆 )
第三天,在长有单克隆的平板上挑一个生长状态好的单克隆接到4ML新鲜培养基,过夜培养
第四天,如你说的,按1:100扩大培养;OD达到0.5-0.6开始制备感受态细胞
制备好的感受态细胞分装到1.5EP管中,一般为100UL每管
感受态效价的测定:
转0.1ng标准质粒到100ul的感受态细胞中----1.5KV电压电击----37度培养1小时----稀释 涂布
所谓的“稀释倍数”是指这的稀释
一般情况下TG1电转感受态的效价(即转化频率)在10^8--10^9
所以反推预测,我们一般会稀释10^-2---10^-3梯度来涂布.
如果涂布50ul,假设在10^-2板上N个菌落,
套公式:
转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积
转化子总数=N×10^2×100/50=2N×10^2
转化频率(转化子数/每ug 质粒DNA)=转化子总数/质粒DNA 加入量(ug)
转化频率=2N×10^2/10^-4(0.1ng=10^-4ug)
=2N×10^6
你自己推算一遍,如果在10^-3板上Y个菌落的转化频率是否为2Y×10^7.
一样的,只不过是不同方法制备的感受态细胞,一个是电转感受态,你的是化转感受态.计算方法还是相同地.

计算感受态细胞转化率公式中的稀释倍数指的是哪个的稀释倍数?是指挑菌接种1:100的那个比例吗?转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积 我用的是CaCl2法制备的 转化感受态细胞的目的是什么转化感受态细胞的前因后果 为了提高感受态细胞的转化率,实验中需要考虑哪些因素?最好能举点例子 大肠杆菌感受态细胞转化实验中冰浴的作用是什么? 影响感受态细胞转化效率的因素有哪些 感受态细胞的转化要注意些什么? 感受态细胞转化效率的高低与哪些因素有关? 蒙脱石散的吸附力公式中的样品和标准品的稀释倍数是多少啊?如何计算的, 怎样检验感受态细胞转化是否成功 转化实验中除了用大肠杆菌的感受态细胞还可以用哪种菌的感受态细胞?如题,不同的实验中是不是用不同的感受态细胞?都有哪些种类的感受态细胞? 转化感受态细胞时 电击法为什么比氯化钙法转化率高 感受态细胞的制备·转化·细胞转染·菌种培养相关方法及原理 关于稀释倍数的计算请问应该怎么理解式中的那个稀释倍数啊···如图 大肠杆菌转化的机理与感受态细胞的制备方法的研究进展(希望答案详细) 感受态细胞的制备及转化平板上菌落的多少跟什么原因相关 不同的转化子可以同时进入同一个大肠杆菌感受态细胞吗 感受态细胞的制备和转化中 为什么要加两次Cacl2?Cacl2为什么要预冷? 感受态细胞BL-21与DH5a的各自作用是什么?在进行转化时如何选择?