请问real time PCR实验为什么要使用内参基因?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/30 23:03:26

请问real time PCR实验为什么要使用内参基因?
请问real time PCR实验为什么要使用内参基因?

请问real time PCR实验为什么要使用内参基因?
举例说吧,想用RT分析两种不同的细胞（高氧、低氧两种条件的培养物）中A基因的表达水平,RT可以鉴定出两种状态下细胞总RNA样品内A基因量的差异,但这个差异包含着误差：
1,总RNA量的不准确性,虽然用分光光度计计算了浓度,但实际上还是有误差的存在,对那些表达水平只差那么丁点儿的样品尤其关键；
2,细胞整体表达水平会在不同情况下有差异,比如说高氧状态下细胞分裂速度更快,此时细胞内绝大多数基因表达水平都上调了,那此时A基因的增加就包括了整体水平的增加量和氧特异性诱导产生的增加量.
所以,我们需要找个能够表现细胞整体表达状态的基因作为参照,用来扣除第2种误差,同时,该参照也可以减少第1种误差对实验结果的误导.

做定量空白对照！

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