作业帮为什么测A260 / A280,他表示什么?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/28 10:26:58
为什么测A260 / A280,他表示什么?
为什么测A260 / A280,他表示什么?
为什么测A260 / A280,他表示什么?
这个比值是在测量DNA,RNA提纯后的纯度的,
如果有蛋白质污染,这个比值就比较小.因为蛋白质在280处有吸收值.高纯度的DNA、RNA这个比值应该在1.8-2左右.
这个网页有几个图,你注意看最下方的那个,纵坐标是比值,横坐标是纯度,
是RNA/DNA吧，RNA在260nm有吸收峰，而DNA在280nm有吸收峰
A280是指氨基酸的紫外光吸收的最大峰值在280nm波长。用来分析蛋白质的含量。A260则是核酸分子的紫外吸收最大峰值在260nm。用来对核酸、核苷酸、核苷和碱基进行定性和定量分析。
A260 / A280的比值， 用于评估样品的纯度， 因为蛋白的吸收峰是280 nm。 纯净的样品比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。
这个比值是用来测量核酸纯度的。纯净的DNA和RNA在A260和A280都有吸收值，但以260最高。而核酸提取过程中最主要的污染物蛋白质在A280处有强烈的吸收值，所以计算这两个吸收峰的比值就可以确定核酸的纯度。DNA的这个值一般是1.8～2.0，而RNA则是2.0。值得注意的是，这个比值并不能很好的反应出核酸的纯度，简单来说寡聚核酸会造成A260值升高，如果核酸有降解，则会导致A260/A280值...
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这个比值是用来测量核酸纯度的。纯净的DNA和RNA在A260和A280都有吸收值，但以260最高。而核酸提取过程中最主要的污染物蛋白质在A280处有强烈的吸收值，所以计算这两个吸收峰的比值就可以确定核酸的纯度。DNA的这个值一般是1.8～2.0，而RNA则是2.0。值得注意的是，这个比值并不能很好的反应出核酸的纯度，简单来说寡聚核酸会造成A260值升高，如果核酸有降解，则会导致A260/A280值上升。另外，如果A280值偏高，并不一定是蛋白污染。蛋白在A280有吸收值是因为其苯丙氨酸等氨基酸残基中所含有的苯环的缘故，所有含苯环的化合物都会在A280有吸收峰。所以如果A280升高虽然有最有可能是蛋白污染，但也有可能是其他苯环物质。如植物DNA提取过程中的多酚类物质污染。另外，如果要求高的话，我们还会要求测量A230的值，正常情况下，核酸的A260/A230和A260/A280是一致的，如果这个值上升则样品可能会含有多糖类的污染。
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