作业帮液相色谱操作都有什么注意事项?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/07 12:15:58
液相色谱操作都有什么注意事项?
液相色谱操作都有什么注意事项?
液相色谱操作都有什么注意事项?
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液相色谱仪的一般操作步骤和注意事项
一、一般的操作步骤：
1)． 首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um.
2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟.
3)． 正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直至色谱柱中有机相冲净为止) .
4)． 一般情况下,流动相冲洗20-30分钟后,仪器方可稳定,最重要的是仪器基线走后,方可进样测试.
5)． 同时进两针标样,将其结果相比较,其结果的比值在0.98-1.02之间后,就可以正式进行样品的测试了.
6)． 样品测试结束后,就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护.如流动相为缓冲试剂,同样也要用重蒸水清洗10-20分钟,方可用有机相进行保护,否则,有损色谱柱.
7)． 关机时,先关计算机,再关液相色谱.
8)． 填写登记本,由负责人签字.
二、 注意事项：
1)． 流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水.脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡.
2)． 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子.
3)． 所有过柱子的液体均需严格的过滤.
4)． 压力不能太大,最好不要超过150kgf/cm2 .
5).因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱,所以,每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洗.
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