作业帮DNA苯酚氯仿提取法和试剂盒纯化有什么区别看到文献上纯化DNA小片段（约100bp）,然后作连接实验.他们的实验是高精度的.有一步专门强调是用苯酚氯仿提取法来提纯,而不是像其他步骤那样直
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/12 16:35:06
DNA苯酚氯仿提取法和试剂盒纯化有什么区别看到文献上纯化DNA小片段（约100bp）,然后作连接实验.他们的实验是高精度的.有一步专门强调是用苯酚氯仿提取法来提纯,而不是像其他步骤那样直
DNA苯酚氯仿提取法和试剂盒纯化有什么区别
看到文献上纯化DNA小片段（约100bp）,然后作连接实验.他们的实验是高精度的.有一步专门强调是用苯酚氯仿提取法来提纯,而不是像其他步骤那样直接用试剂盒提取.想不通是什么道理.
一楼仁兄的回答已在别处阅览过的。请大家指教自己知道的知识，不要直接拷贝别人的答案哈。
DNA苯酚氯仿提取法和试剂盒纯化有什么区别看到文献上纯化DNA小片段（约100bp）,然后作连接实验.他们的实验是高精度的.有一步专门强调是用苯酚氯仿提取法来提纯,而不是像其他步骤那样直
酚－氯仿方法是提取核酸的经典方法,主要原理是利用核酸、蛋白等杂质在水相和有机相中溶解度不同而重新分配.
试剂盒原理是在特定溶液环境下（高盐、低pH)使核酸吸附在固相介质（一般是硅胶膜）上,洗涤去除杂质后,再改变溶液环境使DNA溶解到纯水或TE中.
酚氯仿方法经典、便宜,用的都是实验室常用试剂,提纯效率和纯度都很高,但缺点是费时费力,苯酚和氯仿还有一定毒性,我见过的实验室很少有用这种方法的.
试剂盒严格来说也分好多种,经典的是离心柱的,就是把硅胶膜固定在离心管中,类似于超滤膜,用离心力或者负压让液体通过硅胶膜,核酸就留在膜上.在经过洗涤、洗脱的步骤得到核酸.这种方法的优点是操作简单、时间短,现在也能达到很高的质量,价格也不贵.缺点是不易放大,需要多次离心.
试剂盒基本步骤是先使样本裂解,在特定溶液中通过离心流过硅胶膜,再经过几次洗涤,最后加上洗脱液,离心后核酸就溶解到洗脱液中.具体的你可以根据你自己的需要到网上查一下说明书,现在做试剂盒公司的很多,步骤大同小异.
试剂盒也不是一定很便宜,对一些难度高（病毒核酸、法医样本核酸）或者要求高（去内毒素）的用途也比较贵.还有一种磁珠法提取,不需要离心,易于放大,可以用于自动化操作.这种高端一点的产品基本上是外国公司垄断的.
国内也有一批人在做这种磁珠,希望能打破这种垄断.上海交大的古宏晨教授和他创立的上海奥润微纳就是这批人的代表.（有点打广告的嫌疑,看在码了这么多字的份上也可以理解哈）