设计PCR引物时Tm温度有没有具体要求?比如说,Tm必须小于72度,或大于72度?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/10 06:51:24

设计PCR引物时Tm温度有没有具体要求?比如说,Tm必须小于72度,或大于72度?
设计PCR引物时Tm温度有没有具体要求?比如说,Tm必须小于72度,或大于72度?

设计PCR引物时Tm温度有没有具体要求?比如说,Tm必须小于72度,或大于72度?
The best temperature for Taq polymerase is 72C. If your primer Tm is higher than 72C, then the polymerase would not work well, since the primer will not anneal to the template. If your primer Tm is lower than 50C, there are chances you would have non-specific bands. Therefore, in my experience, Tm for primers can be 50 to 70C, the best range is between 55 to 65.

若按公式Tm= 4(G+C)+2(A+T)估计引物的Tm值,则有效引物的Tm为55~80℃,其Tm值最好接近72℃以使复性条件最佳。

PCR引物的Tm最好在55℃以上,以减少引物错配。一般以60℃~65℃左右为宜。

Tm=2(A+T)+(C+G)

设计PCR引物时Tm温度有没有具体要求?比如说,Tm必须小于72度,或大于72度? 用primer 5.0 设计引物的时候,哪个才是真正的PCR产物退火温度Tm,看哪个? 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? 我在做PCR时,有好多的引物,Tm值在40-62之间,不知道用什么温度比较好. 请教如何计算出兼并引物的退火温度我是一个新手,如何根据公司送来的兼并引物的单子上的Tm值推出实际PCR时的退火温度呢?引物单子上有两个Tm值,分别是1M 钠离子,50mM钠离子条件下的Tm值.实 pcr引物的设计有哪些要求 做RT-PCR设计引物时,找引物序列有哪些好方法? 做PCR时,怎么设计引物? PCR反应温度怎么设置?由于刚刚开始做实验,什么都不懂,PCR引物的Tm值一条为50.6一条为54.3目标片段为195bp请问PCR反应程序该怎么设计啊? pcr引物怎么设计 PCR引物设计 怎么样设计pcr引物 如果从primer5中得到引物的tm 值怎么确定pcr温度 关于退火温度与引物Tm~我用PP5做的引物发现引物Tm值比退火温度低 这很奇怪啊,做PCR是不是退火温度一定要比Tm高呢? 询问PCR退火温度设计引物单上数据如下上游TTACAAGATGGAGCCTCACC(GC含量50%)Tm(1M Na+):68.2Tm(50mM Na+):46.6下游CAAAGAATAACCCAGGACGA(GC含量45%)Tm(1M Na+):66.2Tm(50mM Na+):44.6顺便问下大家,Tm(1 为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用 RT-PCR,自己前后引物Tm差7度,前引物63度,后引物58度,退火温度如何设置? realtime pcr 预实验的问题做realtime pcr 时,设计好引物后,用普通的pcr仪跑没有条带,是怎么回事啊?这样还能做realtime吗?排除引物设计的问题,因为是公司设计的.