什么是western印迹技术?

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/30 13:47:22

什么是western印迹技术?
什么是western印迹技术?

什么是western印迹技术?
蛋白质经单向电泳后分离后被转移到硝酸纤维滤膜上,然后用放射性或酶标记的特异抗体来检测相应抗原的存在.
蛋白质印迹技术是1975年Southern建立了Southern印迹法后,人们用类似的方法对蛋白质进行印迹分析,称为Western印迹法.
Western印迹法是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对不同分子量的蛋白质进行分离,然后通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印到固相支持物上.固相支持物包括NC（硝酸纤维素）膜、尼龙膜及PVDF（聚偏氟乙烯）膜等.通常使用的PVDF膜的规格是0.45 μm,如果靶蛋白的分子量小于10KD,则选用0.22μm的PVDF膜.转膜的的方式有湿转和半干转.用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与膜进行杂交,使抗体与靶蛋白特异性结合后,再与经辣根过氧化物标记的二抗结合,最后用ECL试剂反应,经X线片曝光、显影等一系列反应,达到检测靶蛋白的目的.

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