RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?我做反转录的操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水,65C反应10min,冰上放置5min后,再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应25℃10min,37℃60min,70℃10min.我想

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/06 01:49:35

RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?我做反转录的操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水,65C反应10min,冰上放置5min后,再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应25℃10min,37℃60min,70℃10min.我想
RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?
我做反转录的操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水,65C反应10min,冰上放置5min后,再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应25℃10min,37℃60min,70℃10min.我想请教每一步的原理,为什么这么做?

RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?我做反转录的操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水,65C反应10min,冰上放置5min后,再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应25℃10min,37℃60min,70℃10min.我想
操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水
65C反应10min,冰上放置5min后:这一步是让RNA变性,把RNA的二级结构打开;
再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,
反应25℃10min:这一步是让反转录引物(oligodT,随机引物)和模板RNA退火结合
37℃60min:这一步是反转录酶的工作温度
70℃10min:这一步是变性,把合成的cDNA和RNA变性开,就拿到单链的cDNA

问mRNA转录成cDNA的过程原生物的DNA转录成mRNA后,在反转录酶的催化下,生成的杂交分子是由什么构成的?是一条RNA和一条DNA单链构成还是一条DNA双链? RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?我做反转录的操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水,65C反应10min,冰上放置5min后,再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应25℃10min,37℃60min,70℃10min.我想 mRNA如何反转录成cDNA? 深度测序的read是什么 mapping到基因组是RNA还是DNA基因组.是否所有的深度测序都要RNA先反转录成cDNA RNA反转录成cDNA只要一个引物还是一对引物,原理是啥,我有点糊涂了 提取得总RNA有蛋白质污染会影响反转录的CDNA的浓度吗 2微克RNA反转录后的cDNA浓度大约为多少 PCR时,将RNA反转录成cDNA反应体系怎么算 提RNA OD值很高,但反转录的cDNA值还可以,提了好多回RNA,OD值260//280总是大于2.2,硬着头皮做了反转录,用的FEMENTAS的盒子,cDNA OD值260/260是1.7左右,浓度1800ng/ul,这样的cDNA能用吗?是260/280,写错了。大 我提取RNA,反转录得到cDNA,我要由此扩增功能基因,请问引物设计时,用查到的mRNA序列,还是用cDNA序列我要克隆一个基因,从NCBI查到该基因近似物种的mRNA(没有查到cDNA).我的路线是先提取RNA,反转录 在研究基因突变的时候,直接提取DNA和提取RNA反转录为cDNA进行分析有什么区别?分别在什么条件下使用这两种方法呢? 反转录与逆转录的区别?我的必修课本 讲病毒的RNA“逆转录”入细胞但选修课本讲基因工程时 说mRNA“反转录”成cDNA是不是就是这个区别呢? mRNA反转录中使用olig(t)18做引物所得到的是单链cDNA吗?如果是的话如何才能得到双链的cDNA啊?再麻烦各位大虾们,反转录所得的cDNA为什么不能用琼脂糖凝胶加EB溶液进行直接检测呢?既然RNA 反转录问题求教!我提完RNA之后,用TAKARA的反转录试剂盒反转cDNA第一链,结果出现好几条带,附图如下: 双酶切鉴定(或者测序)是否含有目的基因的时候,为何用pMD18-T载体?过程主要是:从小麦胚胚芽鞘中提出总的RNA,反转录cDNA,然后纯化cDNA,特异性PCR扩增,电泳,得到目的基因,然后连接载体pMD18-T 由mRNA反转录形成cDNA的过程大致分为哪些步骤? cDNA文库中的DNA来源于mRNA的反转录过程,怎么理解 第二代测序可以直接以RNA为模板么?还是反转录成cDNA?中国哪里可以做呢?它能展示不同基因的表达量差异么第二代测序可以直接以RNA为模板么?还是反转录成cDNA?哪里可以做呢?它能展示不同基