[求助] PCR产物条带很淡最近做的PCR一直条带很淡,已经调了一些条件,还是没有效果. 目前是这样的:目的片段大约2.5kb,退火温度55度,从电泳的结果看来目的条带很整齐,也没有非特异性扩增,

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 14:53:16

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[求助] PCR产物条带很淡
最近做的PCR一直条带很淡,已经调了一些条件,还是没有效果.
目前是这样的:目的片段大约2.5kb,退火温度55度,从电泳的结果看来目的条带很整齐,也没有非特异性扩增,就是非常淡,我没有办法回收,而且存在引物二聚体(这是我的引物无法避免的).退火温度调低1度就会出现非特异性扩增,调高一度条带就会消失.请教一下各位,条带很淡的原因?有什么改进的办法吗?谢谢!

[求助] PCR产物条带很淡最近做的PCR一直条带很淡,已经调了一些条件,还是没有效果. 目前是这样的:目的片段大约2.5kb,退火温度55度,从电泳的结果看来目的条带很整齐,也没有非特异性扩增,
加多几个循环,或者换好一点的Taq酶

是做克隆吗???可以取第一次的产物4,5ul作为模板,进行第二次PCR,你应该会得到足够的量。。

调整模板量,模板量太多或者太少均得不到很亮的条带。 4 增加循环数!增加模板量 RT-PCR一般是用来检测基因的表达情况,产物量少应该是说明该

[求助] PCR产物条带很淡最近做的PCR一直条带很淡,已经调了一些条件,还是没有效果. 目前是这样的:目的片段大约2.5kb,退火温度55度,从电泳的结果看来目的条带很整齐,也没有非特异性扩增, 请问各位朋友,pcr产物条带很淡,是什么原因?有哪些好的改良方法? PCR产物条带浅怎么办 PCR产物电泳鉴定时Marker条带竟然没有.我前两天跑电泳的时候,PCR产物倒是能看到条带,就是marker条带没有了,不晓得是怎么回事?以前跑电泳时,Marker条带都很清晰的. RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么? PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激. PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. 嵌套式 PCR第二步反应无产物?嵌套式PCR怎么稀释第二部的产物?我试过2倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、100倍,都没有条带.第一次pcr有条带,不过较淡.是用无菌水稀释没错吧?然后做为第二部的 关于转基因植株检测的问题我做的是大豆转基因,最近做检测,用328bp的引物做PCR时质粒很正常,可是基因组在328bp左右没有出现条带,而在700bp出现很亮的条带;用35S引物PCR,在目的条带那 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? PCR跑出非特异条带?怎么办?1楼做PCR的时候加了水为模板,做为阴性对照.可是居然跑出了跟目的条带大小一样的条带,只是淡了一些.目的片段大小就100bp左右.可能是什么原因呢?做PCR的水要求高 嵌套式PCR怎么稀释第二部的产物?我试过2倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、100倍,都没有条带.第一次pcr有条带,不过较淡.是用无菌水稀释没错吧?然后做为第二部的模板再次PCR?是用无菌水稀释 关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?3.PCR反应程序细菌16SrDNA V3区扩增:95°C 5min;93°C 30 【求助】微卫星条带的问题是鱼虾的微卫星的PCR产物,用筛选的引物跑出来的带只有一排整齐的带,150bps左右,我看别人的文章都是很丰富的条带,好多的,我的怎么这么少呢? 电泳同时点了总DNA和PCR之后的产物以作对比,但总DNA没有条带,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,为什么 做PCR时引物过量会产生什么样的条带