由于PCR产物反向插入到T载体中,利用重组质粒进行测序,得到的序列是反向序列,怎样得到正向序列啊

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/12 06:27:04

由于PCR产物反向插入到T载体中,利用重组质粒进行测序,得到的序列是反向序列,怎样得到正向序列啊
由于PCR产物反向插入到T载体中,利用重组质粒进行测序,得到的序列是反向序列,怎样得到正向序列啊

由于PCR产物反向插入到T载体中,利用重组质粒进行测序,得到的序列是反向序列,怎样得到正向序列啊
T载体只是为了方便克隆的一个中间步骤,所以序列没有正反之分,后面还需要进一步酶切,连接到目标载体中.测序的结果可以通过软件调整,3‘到5’,或者5‘到3’,可以通过DNAMAN或者primer等实现~

你可以用软件 把序列反过来读就可以了

由于PCR产物反向插入到T载体中,利用重组质粒进行测序,得到的序列是反向序列,怎样得到正向序列啊 如何确保pcr产物以正确的方向克隆到表达载体中 (未翻译方向) 具有3'到5‘外切活性DNA聚合酶的PCR产物不能用末端加A尾活性连到T载体上吗 简述用T-克隆载体进行PCR产物克隆的原理 PCR产物一天会降解吗?回收能与T载体连上吗? PCR纯化产物与T载体连接后放置两天影响转化吗 PCR法如何确定载体中插入片段的长度大小? 转基因为什么不能直接用PCR产物连接在表达载体上?我在做小麦转基因到拟南芥中,今天在想为什么不能把目标基因PCR后直接表达载体构建,而要用克隆载体后再构建表达载体? TA克隆时,如何选择T载体?在三博克隆测序,PCR产物长度只有85bp,选择什么样的T载体比较好呢? PCR扩增时,引物是否插入载体后再复制? 如果不用PCR技术,而是在目的片段上直接加上A这个碱基,然后导入到T载体中,可不可以呢 PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体+目的片段,那么转化挑克隆提取的质粒片段是多大?PCR产物TA克隆,PGEM-T 载体的序列是大约3000bp,PCR产物的目的片段是450bp,那么:经过连接、转化后挑单克隆,提取质粒,提 为什么我们基因克隆老失败我们做的是拟南芥中一些基因cds的克隆,在设计引物时加上酶切位点,PCR之后通过酶切与载体相连.但是为什么老是失败,起初我们直接切得PCR产物,由于那样切没切开 PCR的产物3末端有A 而T载体的3末端有T.都是3末端,怎么连接上呢? 请问,把PCR产物拿去生物公司测序的问题是不是也是先要将PCR产物DNA连到载体上,再用载体的通用引物测序?应该不是吧……这个应该属于克隆测序吧?PCR产物直接测序是否就是直接用你给他的引 我们机构想使用博凌科为的pSURE-T 载体连接试剂盒,据说可以简化PCR产物的克隆,用过的给我介绍下 转化后PCR无条带把连接产物连接到T载体之后转化大肠杆菌,用连接产物片段上有而T载体上没有的Kana抗性进行筛选,有转化子长出.培养转化子后PCR,却扩增不出目的条带(即之前的连接产物,约3k 有的聚合酶在PCR产物的3,末端可以接上碱基A,易于与T载体连接,请问载体上的T碱基位于哪个末端?如果也位于3,端,似乎他们两个连不上啊