作业帮质粒转染细胞第一次预实验转染效率较好,再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/28 00:00:56
质粒转染细胞第一次预实验转染效率较好,再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗?
质粒转染细胞第一次预实验转染效率较好,再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗?
质粒转染细胞第一次预实验转染效率较好,再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗?
一般不应该是质粒的问题,如果你担心是反复冻融的问题,建议分装或是在4摄氏度解冻.
最容易出问题的应该是转染试剂和细胞状态.
不知道你用的什么转染试剂,PEI因为带正电荷,通常来说比较容易进细胞,但是毒性较大.通用的转染试剂是Lipofectamin2000,但是针对不同的细胞,转染试剂也不一样.
至于细胞,看贴壁还是悬浮,通常说来,贴壁容易转.如果是悬浮的,建议你离心后再转染.
一般是三个东西容易出问题，你自己看看：
1.质粒：是否反复冻融，存放时间长短，质粒抽提的试剂是否改变，质粒是否重组
2.转染试剂：存放方式，存放时间，是否变质，是否更换转染试剂
3.细胞状态
质粒转染细胞第一次预实验转染效率较好,再做就转不进去了或者转染效率不到5%,是质粒反复冻融的问题吗?
思考题,在哺乳动物细胞转染实验中为提高转染效率需要注意哪些问题
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