怎样提取核酸中DNA,RNA

怎样提取核酸中DNA,RNA
怎样提取核酸中DNA,RNA

怎样提取核酸中DNA,RNA
高中生物必修2中有DNA的粗提取实验,你可以去看看.
DNA：1.实验材料必须准备充足.本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得.每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液.宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡.如果不具备购买活鸡的条件,也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂.
2.盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器.鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少.因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程中DNA的损失.
3.获取较纯净的DNA的关键步骤.
(1)充分搅拌鸡血细胞液DNA存在于鸡血细胞的细胞核中.将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA.
(2)沉淀DNA时必须用冷酒精实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精,并在冰箱(至少5S以下)中至少存放24 h.
(3)正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌.教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子.进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动510 min.
RNA：酵母RNA的提制（浓盐法）
一、目的
学习和掌握从酵母中提制RNA的原理和方法,以加深对核酸性质的认识.
二、原理
酵母含 RNA 2.67％～10.0％,DNA很少（0.03％～0.516％）,而且菌体容易收集,RNA也易于分离,所以选用酵母为实验材料.
RNA提制过程是先使RNA从细胞中释放,并使它和蛋白质分离,然后将菌体除去.再根据核酸在等电点时溶解度最小的性质,将pH调至2.2.5,使RNA沉淀,进行离心收集.
提取RNA的方法很多,在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法.前者利用稀碱溶解细胞壁,使RNA释放出来,这种方法提取时间短,但RNA在此条件下不稳定,容易分解；后者在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的透性,使RNA释放出来,此法易掌握,产品颜色较好.
三、仪器、试剂和材料
1．仪器
（1）量筒（50ml）
（2）三角瓶（100ml）
（3）烧杯（250ml,50ml,10ml）
（4）布氏漏斗（40mm）
（5）吸滤瓶（125ml）
（6）表面皿（6cm）
（7）751型分光光度计
（8）离心机（4000r／min）
（9）恒温水浴
（10）药物天平
（11）烘箱
2．试剂
（l）NaCl（化学纯）
（2）6mol／L HCI
（3）95％乙醇（化学纯）
3．材料
鲜酵母或干酵母；pHO.5.0的精密试纸.
四、操作步骤
1．提取
称取鲜酵母 159或干酵母粉 2.5g,倒入 100ml三角瓶中,加 NaCl 2.5g,水25ml,搅拌均匀,置于沸水浴中提取lh.
2．分离
将上述提取液用自来水冷却后,装入大离心管内,以4000r／min离心10min,使提取液与菌体残渣等分离.
3．沉淀RNA
将离心得到的上清液倾于50ml烧杯内,并置入放有冰块的250ml烧杯中冷却．待冷至10℃以下时,用6mol／L HCI 小心地调节pH值至2.2.5（注意严格控制pH）.调好后继续于冰水中静置10min,使沉淀充分,颗粒变大.
4．洗涤和抽滤
上述悬浮液以 4000r／min离心 10min,得到 RNA沉淀.将沉淀物放在 10ml小烧杯内,用95％的乙醇 10ml充分搅拌洗涤,然后在布氏漏斗上用射水泵抽气过滤,再用 95％乙醇5～10ml淋洗 3次.
5．干燥
从布氏漏斗上取下沉淀物,放在6cm表面皿上,铺成薄层,置于80℃烘箱内干燥.将干燥后的RNA制品称重,存放于干燥器内.
6．含量测定
将干燥后RNA产品配制成浓度为 10—50pg／ml的溶液,在751型分光光度
计上测定其260nm处的吸光度,按下式计算RNA含量：
式中,A260为260nm处的吸光度；L为比色杯光径（cm）；0.024为lml溶液含lμg
RNA的吸光度.
五、结果处理
根据含量测定的结果按下式计算提取率
六、注意事项
1．用浓盐法提取RNA时应注意掌握温度,避免在20～27℃之间停留时间过长,因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶作用活跃的温度范围,会使RNA降解而降低提取率.
2．加热至90～100℃使蛋白质变性,破坏两类磷酸酯酶,有利于RNA的提取.

我懂的不多 才初三 不过RNA就是核酸 DNA是脱氧核糖核酸.

DNA，RNA不就是核酸？前者也叫脱氧核酸