我用BL21(DE3)菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 16:59:31

我用BL21(DE3)菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢?
我用BL21(DE3)菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢?

我用BL21(DE3)菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢?
有两种可能,一种是大肠杆菌里本身有这么大小的蛋白,不过这个可能性太小.另外一个是叫做本底表达,就是你导入后目的蛋白在未诱导情况下也会表达,这可能是大肠杆菌产生了类似IPTG的物质,这个在原核表达中是很常见的,如果本底表达量不大的话对实验结果没什么影响的.

我用BL21(DE3)菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢? 原核基因在大肠中表达存在密码子偏爱性吗?我在做芽孢杆菌一个蛋白的异源表达,基因克隆了,用的pET-28a,表达菌株是BL21(DE3)pLysS,测序也没有问题,25℃、30℃、37℃都诱导了,IPTG为0.5mM.可就是不 您那有BL21(DE3)plysS菌株吗,可以邮寄些给我吗, 表达型大肠杆菌BL21(DE3)PLySs感受态细胞转化培养BL21(DE3)PLySs感受态细胞在转化培养时,如果用SOC培养基,需要另外加氯霉素吗?如果选用BL21(DE3)感受态细胞对于PE28+载体转化表达来说,有没 BL21(DE3)plyss 表达T7溶菌酶的具体作用啊?是怎样降低不低基因背景的? 如何用SDS进行SDS-page 用灰度比进行检测目的蛋白表达相对量的多少,如何解决上样浓度带来的误差?是否能以一个管家基因表达的蛋白为参照?其菌种为bl21(de3),若能解决请给出其表达的蛋白大小 pET-his载体为什么必须在BL21(DE3)菌,而不能在DH5α中表达? 关于表达质粒转化BL21(DE3)的问题用表达空载体pET28a和重组表达质粒pET4c9转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,在含有卡那霉素的琼脂平板上选择培养,挑取pET28a和pET4c9转化菌落,请教各位大侠,如果挑取? 使用T7启动子,BL21(DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用RT IPTG诱导表达后的蛋白上样问题经过IPTG诱导完成后的大肠杆菌BL21(DE3)进行SDS-PAGE蛋白检测诱导表达效果,对菌体该如何处理? 目的基因连入表达载体后用不用先转入DH5a扩增、酶切鉴定然后再转入BL21? 博凌科为的BL21(DE3) 感受态细胞 怎么样? BL21(DE3)pLysS感受态细胞,哪家的产品好, pet32a转入bl21(de3)plysS怎么不长菌?什么原因? 为什么我的目的蛋白表达量很少?严重谢谢.做蛋白表达时目的蛋白表达量很少,因为菌种(转入目的基因的bl21)是在-20度保存了近一年的,且一年前是表达出来的,但现在目的蛋白表达量很少,还 BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导 GUS基因可以在大肠杆菌bl21中表达吗?如何检测是否表达以及表达量的多少啊? PGEX系列质粒用什么菌株表达