BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 02:10:26

BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导
BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导

BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导
BL21细胞基因组中的T7 promoter可以被IPTG诱导,诱导后其promoter下游基因产物T7 RNA polymerase表达增多,T7 RNA polymerase又可以将转入BL21细胞中的质粒目的基因转录成mRNA,进而表达为蛋白质.因此,IPTG诱导可以使BL21细胞表达更多目的蛋白.

BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导 我用BL21(DE3)菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢? 为什么用IPTG诱导蛋白没表达?双酶切及PCR验证目的片段连到表达载体pET28a上了(所用的内切酶是BamH1,Hind111).重组质粒转化BL21,试了不同的IPTG浓度,诱导温度,就是没蛋白表达.后来重组质粒转化JM10 pET-his载体为什么必须在BL21(DE3)菌,而不能在DH5α中表达? 不用iptg诱导,蛋白会表达吗我做原核表达,载体为pet30a,转到BL21中,没有加入IPTG的菌液和加入IPTG 的菌液跑SDS-PAGE,在预测蛋白大小处均有蛋白表达,不知道什么原因为了确定是否为我的目的蛋白, 不用IPTG诱导的重组蛋白能在BL21中表达吗,如果表达经SDS-PAGE电泳后能看到条带吗,.我最近在做重组蛋白的表达,我构建好了一个重组载体,启动子是不用IPTG诱导表达的,我跑了两次电泳结果都没 目的基因连入表达载体后用不用先转入DH5a扩增、酶切鉴定然后再转入BL21? 表达型大肠杆菌BL21(DE3)PLySs感受态细胞转化培养BL21(DE3)PLySs感受态细胞在转化培养时,如果用SOC培养基,需要另外加氯霉素吗?如果选用BL21(DE3)感受态细胞对于PE28+载体转化表达来说,有没 IPTG诱导表达后的蛋白上样问题经过IPTG诱导完成后的大肠杆菌BL21(DE3)进行SDS-PAGE蛋白检测诱导表达效果,对菌体该如何处理? 为什么要先构建克隆载体再用表达载体 PGEX系列表达载体的特点我在用其他载体做表达的时候出现了一点问题,有人建议我用pegx系列的载体试一试,请问一下PGEX 系列表达载体有什么特点,在原核中表达,我设了5个iptg浓度,以及4个时 原核基因在大肠中表达存在密码子偏爱性吗?我在做芽孢杆菌一个蛋白的异源表达,基因克隆了,用的pET-28a,表达菌株是BL21(DE3)pLysS,测序也没有问题,25℃、30℃、37℃都诱导了,IPTG为0.5mM.可就是不 大肠杆菌bl21为什么可以用来表达蛋白?而一些克隆用菌为什么不可以,各自有什么特点 关于表达质粒转化BL21(DE3)的问题用表达空载体pET28a和重组表达质粒pET4c9转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,在含有卡那霉素的琼脂平板上选择培养,挑取pET28a和pET4c9转化菌落,请教各位大侠,如果挑取? 使用T7启动子,BL21(DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用RT 基因表达载体中的复制原点有什么用? 转化pET32a一个菌落也不长是什么原因啊我在做分子克隆,克隆了四个片段,要在pET32a载体上表达,可是酶切,连接,转化大肠杆菌BL21以后一个菌落也不长,我已经试过各种载体和目的片段的比例,而 基因表达载体中的复制原点是什么?