不用IPTG诱导的重组蛋白能在BL21中表达吗,如果表达经SDS-PAGE电泳后能看到条带吗,.我最近在做重组蛋白的表达,我构建好了一个重组载体,启动子是不用IPTG诱导表达的,我跑了两次电泳结果都没

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 04:08:36

不用IPTG诱导的重组蛋白能在BL21中表达吗,如果表达经SDS-PAGE电泳后能看到条带吗,.我最近在做重组蛋白的表达,我构建好了一个重组载体,启动子是不用IPTG诱导表达的,我跑了两次电泳结果都没
不用IPTG诱导的重组蛋白能在BL21中表达吗,如果表达经SDS-PAGE电泳后能看到条带吗,.
我最近在做重组蛋白的表达,我构建好了一个重组载体,启动子是不用IPTG诱导表达的,我跑了两次电泳结果都没有看到目的条带..我现在不确定到底是根本就没表达呢,还是表达的量很少,根本用肉眼看不到目的条带.请各位指导哈,是不是不用IPTG诱导表达的蛋白就很少啊?跑SDS-PAGE电泳时就看不到目的条带啊?

不用IPTG诱导的重组蛋白能在BL21中表达吗,如果表达经SDS-PAGE电泳后能看到条带吗,.我最近在做重组蛋白的表达,我构建好了一个重组载体,启动子是不用IPTG诱导表达的,我跑了两次电泳结果都没
不用IPTG当然可以表达,当然也可以在SDS-PAGE上看到.但是菌里有那么多蛋白,你不通过诱导你怎么知道哪个是你要的蛋白,难道仅凭marker吗?你必须通过IPTG诱导,然后用不加IPTG的做为对照,你才知道哪个是你要的蛋白,到底表没表达.希望可以帮到你,如需帮助请和我联系

iptg是乳糖操纵子的诱导类似物,这个主要是载体决定的。如果你的启动子是不用IPTG诱导的,那建议你去查你这个载体的基因图谱,看看是怎么回事。一般SDS还是比较敏感的,如果看不到目的条带的话表达量基本就可以忽略了。

不用IPTG诱导的重组蛋白能在BL21中表达吗,如果表达经SDS-PAGE电泳后能看到条带吗,.我最近在做重组蛋白的表达,我构建好了一个重组载体,启动子是不用IPTG诱导表达的,我跑了两次电泳结果都没 不用iptg诱导,蛋白会表达吗我做原核表达,载体为pet30a,转到BL21中,没有加入IPTG的菌液和加入IPTG 的菌液跑SDS-PAGE,在预测蛋白大小处均有蛋白表达,不知道什么原因为了确定是否为我的目的蛋白, 为什么用IPTG诱导蛋白没表达?双酶切及PCR验证目的片段连到表达载体pET28a上了(所用的内切酶是BamH1,Hind111).重组质粒转化BL21,试了不同的IPTG浓度,诱导温度,就是没蛋白表达.后来重组质粒转化JM10 我用BL21(DE3)菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢? IPTG诱导表达后的蛋白上样问题经过IPTG诱导完成后的大肠杆菌BL21(DE3)进行SDS-PAGE蛋白检测诱导表达效果,对菌体该如何处理? 原核基因在大肠中表达存在密码子偏爱性吗?我在做芽孢杆菌一个蛋白的异源表达,基因克隆了,用的pET-28a,表达菌株是BL21(DE3)pLysS,测序也没有问题,25℃、30℃、37℃都诱导了,IPTG为0.5mM.可就是不 BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导 iptg诱导前后在SDS电泳结果中怎么看 IPTG诱导BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白表达的最佳温度,时间,IPTG的浓度,诱导时菌液的最佳浓度. 使用T7启动子,BL21(DE3)菌株,加入的IPTG的终浓度要到多大才能起到诱导的作用RT IPTG诱导表达的作用原理是什么? 诱导大肠杆菌表达时IPTG的量 IPTG的诱导问题我在做诱导是遇到这样一个问题,做了0小时,1,2,3,4,5小时的诱导,可是诱导的蛋白并没有随时间增加而增加,0小时没有,1,2,3,4,5的蛋白量差不多的, 重组蛋白的检测通过SDS-PAGE中重组蛋白在蛋白MARKER的位置判断蛋白的表达情况 和 通过用标签抗体检测重组蛋白判断蛋白表达情况,这样两种方式哪种更好?为什么? 蛋白表达时操作方法对结果有影响吗我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声 诱导表达时IPTG加的时间太早有影响吗? 选择什么载体来表达蛋白质?我敲除了一个基因,然后向通过把该基因的编码区重组到载体中,在lac启动子控制下,进行表达,并且能通过IPTG来控制其表达水平,应该选择什么样的载体?使用的菌株 蛋白质表达一般的条件?本人最近在做蛋白质的诱导表达,我想知道一般的诱导条件是什么?就是诱导时间和加入诱导剂之后的培养时间和条件,以及IPTG的浓度?