IPTG诱导BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白表达的最佳温度,时间,IPTG的浓度,诱导时菌液的最佳浓度.

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/27 21:21:40

IPTG诱导BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白表达的最佳温度,时间,IPTG的浓度,诱导时菌液的最佳浓度.
IPTG诱导BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白表达的最佳温度,时间,IPTG的浓度,诱导时菌液的最佳浓度.

IPTG诱导BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白表达的最佳温度,时间,IPTG的浓度,诱导时菌液的最佳浓度.
一般是将菌摇到OD600=0.4-0.6,然后加入终浓度1mM的IPTG(这个一般不变,诱导不出来再考虑适当多加点,例如2-5mM),但是诱导时间和诱导温度根据诱导蛋白大小、性质的不同而不同,需要摸索的,你可以做个预实验,隔两个小时取样,最后SDS-PAGE,寻找合适诱导时间,如果不想这么麻烦,直接过夜诱导.诱导温度的话一般20-30℃的都有,我同学有次用16℃诱导出来的.

这些条件需要自己摸索,但是有些质粒,在原核表达手册里面有记载,是不需要摸索最佳温度、时间以及IPTG的浓度的,因为这些质粒和工程菌以及从人为的改造过了。建议多看看pET原核表达手册,有中文版,也有英文版。花点时间看看资料,可以让的你实验省事省时很多很多。祝实验顺利!...

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这些条件需要自己摸索,但是有些质粒,在原核表达手册里面有记载,是不需要摸索最佳温度、时间以及IPTG的浓度的,因为这些质粒和工程菌以及从人为的改造过了。建议多看看pET原核表达手册,有中文版,也有英文版。花点时间看看资料,可以让的你实验省事省时很多很多。祝实验顺利!

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