菌液PCR有条带,但提不出质粒,为什么?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 16:07:58

菌液PCR有条带,但提不出质粒,为什么?
菌液PCR有条带,但提不出质粒,为什么?

菌液PCR有条带,但提不出质粒,为什么?
同样的问题,我也正经历着,别着急慢慢分析原因.
如果你做得是质粒的构建,我想根本的原因是没有连接上,那得重新做,考虑连接的问题.
对于你的那个5天得菌液,原则上说菌液放久了,质粒可能会丢失,你可以重新再在抗性培养基里(如果有抗性的话)摇一下.如果没连接好的话估计也提不出质粒.
慢慢来,共勉!

菌液PCR有条带,但提不出质粒,为什么? 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶 PCR没P出条带 很迷茫提了总RNA之后 然后做了反转录 接着用cDNA p一基因 跑胶时 质粒有但没有p的基因 为什么 做了好几次 在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒用pET30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来 质粒双酶切质粒大小正确,菌落PCR,也有条带,但是双酶切就是不成功,有什么建议吗? PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 1.泳道的质粒DNA有几条带?为什么? PCR有扩出来条带,但目的条带不是太亮就有什么原因 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? 质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊? 菌液pcr可以拉出目的条带,但是质粒抽出来酶切结果说是没有插进去,为什么?快抽验证是插入了片段,中抽抽了3次无果,小抽倒是有,可是显示没插入片段,但是菌液pcr怎么会有结果,诡异啊 转基因得到了转化苗,做PCR的时候,如果质粒P出了阳性 对照的基因组没有条带 是不是就能确定没转进去基因第一次做的时候,质粒是阳性的,样品有2个在目的片段那也出现了条带,但很暗,后来再 用pet32a构建表达载体,目的片段是220bp左右,酶切是ecor1和hindlll,但酶切连接转菌提质粒后却只有2000bp做过pcr验证有目的条带,想不明白是为什么.2个月了,求救 用菌斑跑PCR有目的条带,用菌液怎么就跑不出?我用农杆菌菌斑稀释后跑PCR,电泳有目的条带,提质粒也有,为什么用菌液就跑不出呢?与目的基因连在同一载体上的筛选基因用菌液跑却每次都能跑 质粒DNA琼脂凝胶电泳为什么会出四条带 PCR跑电泳每次都有条带但都不亮怎么找原因?PCR跑电泳每次都有条带但都不亮怎么找原因 质粒转化农杆菌感受态后,挑斑摇菌菌液PCR后无条带.我是加了质粒相应的抗生素的,能长斑不久说明转进去了吗,为什么没条带呢?