如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 17:44:24

如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转
如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?
我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转化后测序两者比较起来有什么优缺点?会影响结果的真实性吗?

如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转
楼上说的是一方面.
PCR产物测序也是可以的,可以送粗样,也就是不纯化的,也可以送纯化好的.
但很多公司测的不是很好,所以一般建议转到克隆载体中保存了送菌液或质粒测序.
PCR产物纯化是去除多余的dNTP和引物二聚体.用纯化好的片段连接转化可以降低背景,提高转化效率.通常转化后我们用几种方法来确认转化子,抽质粒酶切是比较可靠的.选择酶切大小与预计一致的克隆去测序.

如果PCR产物可以直接用来测序,但为什么还需要买PCR产物纯化试剂盒,还要进行连接转化提质粒酶切?我的实验是在PCR产物电泳后发现有自己所需要的长度的目的片段.如果直接测序和经过连接转 PCR产物可以直接测序吗 PCR产物直接测序的原理 过短的PCR产物为什么不适于直接测序? PCR产物测序 PCR产物测序问题用PCR产物直接测序,PCR产物是1200bp左右,但是测出来只有1000bp,请问为什么少了这么多序列呢,我是新手,刚开始做,很多不懂得,望请指教, 为什么我们进行16S rDNA测序时,要将扩增产物导入的细菌中,而不直接对纯化后的PCR产物直接测序? 通过16srDNA鉴定细菌的疑惑1、为什么不能把PCR所得溶液直接用来测序,是测序技术的限制么?提供给测序公司的应该是转化阳性的菌液,还是提取出来的质粒?2、pcr产物跑胶后要胶回收再做载体连 PCR产物电泳大小与实际测序不符,为什么? 是做基因克隆还是pcr产物直接测序?我从某植物转录组测序结果中找到一个基因序列,结果预测是有完整ORF的,但我在orf两侧设计引物pcr产物直接测序,多次测序的结果在orf两端的序列都不同,orf PCR纯化产物为什么能直接连接,什么情况下直接连接?求高手指教. 以pcr产物为模板 进行测序pcr NaAc edta 无水乙醇纯化后有很多白色沉淀 为什么? tail-pcr产物测序问题tail-pcr第三轮产物如果较大,比如3个KB,我想分两段测序,怎么设计中间的引物啊, 做基因多态性,PCR产物必须纯化后才能酶切吗我做人脂联素基因多态性,PCR产物后要用Hha Ⅰ做酶切,PCR产物一定要纯化后才能酶切吗?我看网上说要纯化,但打电话问大连宝工说可以不纯化直接酶 pcr产物不纯化直接酶切连接可以吗?PCR反应的buffer会不会对酶产生影响哦~ 10kb pcr产物 测序如何对10kb的pcr产物测序? PCR产物的纯化方式有哪几种?是用于测序的PCR产物, PCR的意义是不是要先知道具体DNA序列后才能设计引物进行PCR?如果是,那么我得到的是一段已知的序列,好像也可以人工合成这段序列而不需要PCR吧?用PCR得到的这些产物究竟可以用来做些什么事