PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的假设我知道,人的某段基因和老鼠的某段基因很相似,我用PCR的方式来克隆人的这段基因,因为我事先已经知道了老鼠的这段基因的序列,所以我可以设计出

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 07:31:15

PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的假设我知道,人的某段基因和老鼠的某段基因很相似,我用PCR的方式来克隆人的这段基因,因为我事先已经知道了老鼠的这段基因的序列,所以我可以设计出
PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的
假设我知道,人的某段基因和老鼠的某段基因很相似,我用PCR的方式来克隆人的这段基因,因为我事先已经知道了老鼠的这段基因的序列,所以我可以设计出引物.但是,我最后得到了PCR的产物,我怎么确保我克隆出来的这段产物基因和老鼠的那段基因是一样的序列呢?

PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的假设我知道,人的某段基因和老鼠的某段基因很相似,我用PCR的方式来克隆人的这段基因,因为我事先已经知道了老鼠的这段基因的序列,所以我可以设计出
将PCR产物凝胶电泳,切割回收DNA长度近似的条带(凝胶回收),将回收提纯的DNA克隆至质粒载体(先酶切再连接),将载体转化至细菌扩增,提取质粒,利用质粒上已知序列作为因为对目的DNA测序,利用Blast比对测序产物与老鼠基因的近似性.这是基因工程的一般通用步骤.
综合成本及效率,测序最为省力.当然,你也可以用特异性酶切位点做一个基本判断,如果基因的同源性很高,可以不用测序. 例如,老鼠基因上有一个酶切位点,如果这段基因于人类的非常相似,用该限制性内切酶切人类基因也可以得到与切老鼠基因相同的效果.

PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的假设我知道,人的某段基因和老鼠的某段基因很相似,我用PCR的方式来克隆人的这段基因,因为我事先已经知道了老鼠的这段基因的序列,所以我可以设计出 PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的假设我知道,人的某段基因和老鼠的某段基因很相似,我用PCR的方式来克隆人的这段基因,因为我事先已经知道了老鼠的这段基因的序列,所以我可以设计出 基因克隆先克隆出来的小片段怎么比全长基因大呢?先是从水稻里通过cDNA 克隆出来小片段基因是1873bp,最后测得全长基因是1715bp,是什么原因呢? 在PCR技术发明以前,人们是怎么做分子克隆的?限制性内切酶是70年代发现的PCR是83年才发明的今天在做实验的时候突然想,没有PCR的时候,研究者是怎么克隆基因的呢?但是PCR技术之前就有基因克 怎么PCR克隆4500bp的DNA长片段想通过PCR设计引物克隆葡萄基因组DNA的4500bp的长片段,可资料上都写着,PCR克隆一般是2000bp,4500bp是不是太长了,能PCR出来吗 Pcr克隆基因与一般DNA的克隆有什么异同 普通PCR和基因克隆PCR的引物设计有什么不同和注意事项? 我的目的基因目前只知道部分序列,现在需要克隆出这个基因全长来,我已经合成了RACE模板及引物,进行了PCR,一直没有出来目的条带 基因的构建与基因的克隆是指一个意思么?就是通过PCR扩增获得目的基因?问题很小白哈. 转录组测序得到的序列,想把一个基因克隆出来,但是不知道序列是不是完整,怎么确定是否完整呢 DNA分子克隆与PCR扩增DNA的区别T载体是克隆载体,能把目的基因片段转染到大肠杆菌扩增,但不表达.我新手弱弱的问一句为什么不直接把目的片段拿去跑PCR就行了,干嘛要用克隆载体去获得大量 怎么查克隆基因载体的来源? 基因克隆和DNA克隆是一样的吗? 基因克隆的步骤 已知一基因两侧序列,如何将该基因克隆你没明白我的意思,是要从如何获得目的基因上来回答;比如,知道一段蛋白质的mRNA序列,就用RT-PCR制备出cDNA,从而克隆。现在是知道两侧序列…… 利用PCR技术进行基因扩增属于细胞水平的克隆吗 我想克隆一个基因.先进行PCR,PCR产物纯化回收,然后连接,转化,一直不成功.回收的片段很亮.我用的是Ex TAQ,他的加A尾效率应该很高了,做T-A克隆应该没有问题,但就是不成功.我还做了平行试验,con 用NCBI搜目的基因序列时会出来好多,怎么分辨那个是自己想要的?