我的PCR产物电泳检测条带单一,为什么测序结果说模板杂?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/09 13:52:24

我的PCR产物电泳检测条带单一,为什么测序结果说模板杂?
我的PCR产物电泳检测条带单一,为什么测序结果说模板杂?

我的PCR产物电泳检测条带单一,为什么测序结果说模板杂?
答:PCR产物电泳检测的结果只是一个粗略的定性结果.对于与目的片段条带大小只相差几个碱基的非特异性PCR扩增产物是无法用肉眼区分开的.但是DNA测序反应敏感而客观,可以直接反应出模板本身的情况.需要强调的是,高质量的PCR产物才可能得到高质量的测序结果,如果您对PCR产物的纯度不很确定,希望您可以将PCR产物进行克隆处理,以确保得到好的测序结果.以下图为例:该反应的背景信号较高,不利于碱基的判读.
解决办法:改变PCR条件,重新扩增.或者可以将该PCR产物克隆到质粒中,初步筛选后进行单克隆测序.

我的PCR产物电泳检测条带单一,为什么测序结果说模板杂? PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? 电泳同时点了总DNA和PCR之后的产物以作对比,但总DNA没有条带,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,为什么 PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么? PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 PCR产物电泳鉴定时Marker条带竟然没有.我前两天跑电泳的时候,PCR产物倒是能看到条带,就是marker条带没有了,不晓得是怎么回事?以前跑电泳时,Marker条带都很清晰的. 请问我的电泳图跑成这样,是为什么?我的模板用的是第一次PCR的产物,体系总共是60微升,模板2微我的第一次PCR用的是质粒DNA 而且产物条带还行 环化的PUCmT载体用Ecor1酶切后电泳检测为什么还是两条带我要把一个65kb的野生大质粒酶切后进行连接,然后将连到载体上的质粒片断送测序以得到质粒全序列,现有的PUCmT是连接PCR产物用的是线 目的DNA PCR扩增产物电泳为什么两个条带亮度不同 PCR产物电泳时,为什么有的条带不亮,有的特别亮呀? PCR产物电泳时,为什么有的条带不亮,有的特别亮呀? PCR模板的问题老师看到PCR产物电泳出的条带比较暗,让我把模板稀释到20倍,以前稀释到50倍,为什么变小了? PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系我用的25微升的反应体系 怎样的PCR产物电泳图较好,从条带多少,宽度及其亮度分析 ISSR标记,PCR产物电泳条带不清晰,怎么办 电泳时总DNA没有条带,但是能P出来,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,这能说明我得到的想要的目的片段了吗? pcr扩增没有条带我用别人肯定能作出来的ISSR体系扩增之后为什么什么条带都没有呢,感觉药品应该没有问题.将DNA稀释100倍后用紫外分光光度计测DNA od260/280 1.8左右,符合要求呀,电泳检测只是轻