作业帮PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系我用的25微升的反应体系
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/04/28 09:49:06
PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系我用的25微升的反应体系
PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系
我用的25微升的反应体系
PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系我用的25微升的反应体系
首先要看你的条带是否清晰,虽然亮度不够但是清晰度应该高,没有拖尾没有非特异条带和引物二聚体,如果以上都没有,仅仅是目标条带不够亮的话,我觉得
你可以将25微升体积同比放大至50微升反应体系,相应的制胶的时候插孔槽用大梳子而不是小的那种.还有很重要的就是你的核酸染料是什么?我用过几种核酸染料感觉还是EB亮度最好,虽然毒性大了点.
如果条带不够亮,还有拖尾、非特异条带、引物二聚体等问题,那就是你反应体系中需要优化.1、出现非特异扩增可能是你的引物设计上特异性差或者引物浓度过高,Mg浓度或酶含量过高（适当改变Mg浓度从1mM到3mM,间隔0.5mM进行梯度试验,或者酶含量改变按0.5U为间隔梯度试验.）2、如果出现拖尾,要考虑引物特异性和模板纯度,另外循环数、退火温度以及Mg含量过高、dNTP过多等也可能造成拖尾.
增加反应循环数
加大反应体系和循环数
可以适当降低Tm温度
PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系我用的25微升的反应体系
pcr产物电泳后为何条带过宽,而且有的条带清晰,有的则不清晰
PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么?
二次PCR产物,电泳条带与第一次PCR一样不明显,如何解决
一扩产物不够亮,用pcr产物作为模板进行二扩,无目的条带,出现大面积弥散装电泳图.
PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常.
PCR电泳条带是什么,如何形成的?形成原理是什么?
电泳同时点了总DNA和PCR之后的产物以作对比,但总DNA没有条带,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,为什么
怎样的PCR产物电泳图较好,从条带多少,宽度及其亮度分析
我的PCR产物电泳检测条带单一,为什么测序结果说模板杂?
PCR产物电泳时,为什么有的条带不亮,有的特别亮呀?
PCR产物电泳时,为什么有的条带不亮,有的特别亮呀?
ISSR标记,PCR产物电泳条带不清晰,怎么办
如何增加PCR产物?我得PCR扩增循环数是30个,扩增体系是15微升,其中NTP的浓度是1.5,引物和酶都是1,模板是1.2,镁离子的浓度是1.0.能扩出目的条带,但是琼脂糖电泳条带不是很亮,即目的条带的量不
请问PCR过程中目的条带不够亮,是什么原因造成的?应如何解决?
请问PCR过程中目的条带不够亮,是什么原因造成的?应如何解决?
PCR产物电泳鉴定时Marker条带竟然没有.我前两天跑电泳的时候,PCR产物倒是能看到条带,就是marker条带没有了,不晓得是怎么回事?以前跑电泳时,Marker条带都很清晰的.
二次PCR的产物电泳图观察,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,